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文献和实验-alde-hyde fixative)。试剂:过碘酸钠赖氨酸盐酸盐(或盐酸赖氨酸):多聚甲醛蒸馏水配制方法:(1)贮存液A(0.1mol/L赖氨酸-0.5mol/l Na3PO4,pH7.4):称取赖氨酸盐酸盐1.827g溶于50ml蒸馏水中,得0.2mol/L的赖氨酸盐酸盐溶液,然后加入Na2HPO4至0.1mol/L,将pH调至7.4,补足0.1mol/L的PB至100ml,使赖氨酸浓度也为0.1mol/L,4℃冰箱保存,最好两周内使用。此溶液的渗透浓度为300mOs mmol/L/kg
缓冲溶液 一、缓冲溶液与缓冲作用原理 (一)缓冲作用与缓冲溶液 纯水在25℃时PH值为7.0,但只要与空气接触一段时间,因为吸收二氧化碳而使PH值降到5.5左右。1滴浓盐酸(约12.4mol・L-1)加入1升纯水中,可使[H+]增加5000倍左右(由1.0×10-7增至5×10-4mol・L-1),若将1滴氢氧化钠溶液(12.4mol・L-1)加到1升纯水中,PH变化也有3个单位。可见纯水的PH值因加入少量
干燥; 2. 对于培养细胞,可直接制备爬片,也可有PBS洗细胞一次,加10%福尔马林静置过夜,用橡胶刮下细胞;用PBS洗细胞两次,2000rpm×3min,用5ml PBS重悬细胞,即可用甩片机甩片或直接吸50μl点在载玻片上。 二、切片预处理(蛋白酶消化) 试剂与配置 0.1mol/L Tris-HCl (pH7.4) 缓冲液A:0.1mol/L Tris-HCl (pH7.4),0.3% Tween-20,0.5% NP-40 蛋白酶K:20-50μg/ml,溶于TE中
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