- ¥140
- 赛泓瑞
- BC114-01
- 南京
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
-70度
- 保质期：
半年
- 英文名：
BJ5183-AD-1感受态细胞
- 库存：
大量
- 供应商：
赛泓瑞
产品介绍
BJ5183-AD-1感受态细胞携带的pAdEasy-1质粒包含了大部分人腺病毒5型的基因组序列（E1/E3基因缺失），表达可供pAdEasy-1骨架质粒和pAdEasy穿梭质粒进行同源重组的所有组分，产生重组腺病毒质粒。pAdEasy-1为33.5kb，具有氨苄青霉素抗性，一旦与穿梭载体重组，其抗性消失。卡那霉素抗性的pAdTrack-CMV质粒检测感受态细胞的转化效率大于10的3次方cfu/μg DNA。
BJ5183-AD-1感受态细胞产品储存
-70℃保存，避免反复冻融。
BJ5183-AD-1 感受态细胞 目录号：BC114 储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。 产品说明： BJ5183-AD-1菌株携带的pAdEasy-1质粒包含了大部分人腺病毒5型的基因组序列（E1/E3基因缺失），表达 可供pAdEasy-1骨架质粒和pAdEasy穿梭质粒进行同源重组的所有组分，产生重组腺病毒质粒。pAdEasy-1为 33.5kb，具有氨苄青霉素抗性，一旦与穿梭载体重组，其抗性消失。卡那霉素抗性的pAdTrack-CMV质粒检测 感受态细胞的转化效率大于10 3 cfu/μg DNA。 基因型：endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (StrR ) [pAdEasy-1 (Amp R )] 菌株抗性：对卡那霉素敏感，对链霉素和氨苄青霉素抗性 质粒转化步骤： 1. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入 1-5μl 含有 1-100ng 的质粒 DNA 到细胞中，用 手指拨打管底，轻轻混匀； 2. 冰水浴中放置 30 分钟，不要晃动； 3. 42℃热击 60 秒钟，不要晃动； 4. 冰水浴中放置 2 分钟，不要晃动； 5. 加入 500μl 的室温的 SOC 或 LB 培养基； 6. 置于 37℃摇床中，150-200rpm 震荡复苏培养 60 分钟； 7. 取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后，倒置平板，37℃培养 12-18 小时。 （平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心 30 秒钟，弃掉上清，留 100μl 左右的液体，用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块，取 10μl 重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的 液体来回划线。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落。） He, T. C., Zhou, S., da Costa, L. T., Yu, J., Kinzler, K. W. et al. (1998) Proc Natl Acad Sci U S A 95(5):2509-14. 组成 BC114-01 BJ5183-AD-1 competent cells 20×100μl pAdTrack-CMV（10ng/μl） 5μl
BJ5183-AD-1感受态细胞携带的pAdEasy-1质粒包含了大部分人腺病毒5型的基因组序列（E1/E3基因缺失），表达可供pAdEasy-1骨架质粒和pAdEasy穿梭质粒进行同源重组的所有组分，产生重组腺病毒质粒。pAdEasy-1为33.5kb，具有氨苄青霉素抗性，一旦与穿梭载体重组，其抗性消失。卡那霉素抗性的pAdTrack-CMV质粒检测感受态细胞的转化效率大于10的3次方cfu/μg DNA。
BJ5183-AD-1感受态细胞产品储存
-70℃保存，避免反复冻融。
BJ5183-AD-1 感受态细胞 目录号：BC114 储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。 产品说明： BJ5183-AD-1菌株携带的pAdEasy-1质粒包含了大部分人腺病毒5型的基因组序列（E1/E3基因缺失），表达 可供pAdEasy-1骨架质粒和pAdEasy穿梭质粒进行同源重组的所有组分，产生重组腺病毒质粒。pAdEasy-1为 33.5kb，具有氨苄青霉素抗性，一旦与穿梭载体重组，其抗性消失。卡那霉素抗性的pAdTrack-CMV质粒检测 感受态细胞的转化效率大于10 3 cfu/μg DNA。 基因型：endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (StrR ) [pAdEasy-1 (Amp R )] 菌株抗性：对卡那霉素敏感，对链霉素和氨苄青霉素抗性 质粒转化步骤： 1. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入 1-5μl 含有 1-100ng 的质粒 DNA 到细胞中，用 手指拨打管底，轻轻混匀； 2. 冰水浴中放置 30 分钟，不要晃动； 3. 42℃热击 60 秒钟，不要晃动； 4. 冰水浴中放置 2 分钟，不要晃动； 5. 加入 500μl 的室温的 SOC 或 LB 培养基； 6. 置于 37℃摇床中，150-200rpm 震荡复苏培养 60 分钟； 7. 取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后，倒置平板，37℃培养 12-18 小时。 （平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心 30 秒钟，弃掉上清，留 100μl 左右的液体，用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块，取 10μl 重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的 液体来回划线。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落。） He, T. C., Zhou, S., da Costa, L. T., Yu, J., Kinzler, K. W. et al. (1998) Proc Natl Acad Sci U S A 95(5):2509-14. 组成 BC114-01 BJ5183-AD-1 competent cells 20×100μl pAdTrack-CMV（10ng/μl） 5μl
BJ5183-AD-1感受态细胞产品特点
对氨苄青霉素，卡那霉素，链霉素，四环素和壮观霉素敏感。
BJ5183-AD-1感受态细胞的使用操作方法
1. 取10UL连接产物与100UL感受态细胞混匀，冰浴20-30min。
2. 42℃水浴热激45s，立即置冰上放置2min。
3. 加入预热至室温的400UL LB培养基（无抗生素）， 37℃恒温摇床培养1h。
4. 取100UL菌液均匀涂布于含相应抗生素抗性的LB平板上， 37℃恒温培养箱倒置培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞避免反复冻融
2. 操作过程中动作要轻柔
BJ5183-AD-1感受态细胞产品用于，仅供研究使用，不适用于人或动物体外治疗与诊断。
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