Shuffle T7-B感受态细胞

                             

产品介绍
Shuffle T7-B菌株为大肠杆菌BL21增强型菌株，为Lon和OmpT蛋白酶缺陷型，适用于T7启动子启动的蛋白表达。细胞内组成型表达的二硫键异构酶DsbC不仅有利于表达蛋白形成正确的二硫键，并具有分子伴侣的功能，帮助不含二硫键的蛋白正确折叠。T7 RNA聚合酶基因整合在细菌染色体上的lac操纵子区域，基因组中无λ前噬菌体序列，具有抗T1噬菌体感染特点。Shuffle T7-B感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率大于10的6次方cfu/μg DNA。 

Shuffle T7-B感受态细胞产品特点
对氨苄青霉素，氯霉素，卡那霉素和四环素敏感，对链霉素和壮观霉素有抗性。 

Shuffle T7-B感受态细胞产品储存
-70℃保存，避免反复冻融。 
Shuffle T7-B 感受态细胞 目录号：BC209 储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。
产品说明： Shuffle T7-B 菌株为大肠杆菌 BL21 增强型菌株，为 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型，适用于 T7 启动子启动的 蛋白表达。细胞内组成型表达的二硫键异构酶 DsbC 不仅有利于表达蛋白形成正确的二硫键，并具有分子伴侣 的功能，帮助不含二硫键的蛋白正确折叠。T7 RNA 聚合酶基因整合在细菌染色体上的 lac 操纵子区域，基因 组中无λ前噬菌体序列，具有抗 T1 噬菌体感染特点。Shuffle T7-B 感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒 检测转化效率大于 10 6 cfu/μg DNA。 基因型： fhuA2lacZ::T7gene1[lon]ompTahpCgalλatt::pNEB3-r1-cDsbC(Spec R lacIq)ΔtrxBsulA11R(mcr-73::miniTn10-Tet S )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10 --TetS ) endA1 Δgor ∆(mcrC-mrr)114::IS10 菌株抗性：对氨苄青霉素，氯霉素，卡那霉素和四环素敏感，对链霉素和壮观霉素有抗性。 质粒转化步骤： 1. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入 1-5μl 含有 1-100ng 的质粒 DNA 到细胞中， 用手指拨打管底，轻轻混匀； 2. 冰水浴中放置 30 分钟，不要晃动；

Shuffle T7-B感受态细胞
3. 42℃热击 60 秒钟，不要晃动； 4. 冰水浴中放置 2 分钟，不要晃动； 5. 加入 500μl 的室温的 SOC 或 LB 培养基； 6. 置于 30℃摇床中，150-200rpm，复苏培养 60 分钟； 7. 取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后，倒置平板 30℃培养 12-24 小时。 （平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心 30 秒钟，弃掉上清，留 100μl 左右的液体，用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块，取 10μl 重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的 液体来回划线。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落） （质粒快速转化步骤：将步骤 2 的时间缩短到 5 分钟，对于氨苄青霉素抗性的质粒，步骤 4 完成后，可直 接涂布或划线于含抗生素的平板上。其它抗性的质粒仍需 40-60 分钟的复苏培养。） 组成 BC209-01 BC209-02 ShuffleT7-B Competent cells 10×100μl 20×100μl pUC19（0.1ng/μl） 5μl 5μl 蛋白表达步骤： 1. 挑取单菌落，接种到含 5ml 带抗生素的 LB 培养基中； 2. 30℃，200rpm 震荡培养细菌至对数生长期（OD600=0.4-0.8）； 3. 加入 IPTG 到终浓度为 0.4mM，30℃诱导 4 小时或 16℃诱导过夜； 4. 诱导完成后，离心收集菌体，用合适的方法（如考马斯亮蓝染胶法，Western-Blot法或酶活性分析法） 分析菌体裂解物的总蛋白、上清和沉淀组分，明确表达产物的表达状况（可溶性或不溶性表达）； 5. 重组蛋白大量表达时，可用 10ml 过夜培养物转接到 1L 培养基中，当培养到 OD600=0.4-0.8 时，加入终 浓度为 0.4mM 的 IPTG，30℃诱导 4 小时或 16℃诱导过夜（不同蛋白表达的最佳条件有所不同，需在 实验中优化）。

XL1-Blue感受态细胞产品
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大肠杆菌化学感受态细胞
货号	产品名称	规格	价格
BC101-02	TOP10 感受态细胞	20*100μl	240.00
BC102-02	DH5a感受态细胞	20*100μl	240.00
BC103-02	JM109 感受态细胞	20*100μl	240.00
BC104-02	XL1-Blue 感受态细胞	20*100μl	346.00
BC105-02	Mach1-T1 Phage Resistant 感受态细胞	20*100μl	240.00
BC106-02	DH10B 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC107-02	OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC108-01	Stbl3 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC109-01	XL10-Gold 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC110-01	JM110 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC111-01	DB3.1 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC112-01	DH10BAC 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC113-01	NEB 10-beta 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC114-01	BJ5183-AD-1 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC115-01	Stbl4 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC201-02	BL21(DE3) 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC202-02	BL21(DE3)plysS 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC203-02	M15 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC204-02	Rosetta(DE3) 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC205-02	OrigamiB(DE3) 感受态细胞	20*100μl	420.00
BC206-02	T7表达感受态细胞	20*100μl	420.00
BC207-02	T7pLysY感受态细胞	20*100μl	420.00
BC208-02	Shuffle T7-K12感受态细胞	20*100μl	420.00
BC209-02	Shuffle T7-B感受态细胞	20*100μl	420.00
大肠杆菌电转感受态细胞
货号	产品名称	规格	价格
BC401-01	NEB 10-beta 电转感受态细胞	20*50μl	420.00
BC402-01	BJ5183 电转感受态细胞	20*50μl	420.00
BC403-01	BJ5183-AD-1 电转感受态细胞	20*50μl	420.00
BC404-01	TOP10电转感受态细胞	20*50μl	420.00
BC405-01	DH5a 感受态细胞	20*50μl	420.00
农杆菌化学感受态细胞
货号	产品名称	规格	价格
BC301-01	LBA4404农杆菌感受态细胞	20*100μl	420.00
BC302-01	AGL1农杆菌感受态细胞	20*100μl	420.00
BC303-01	EHA105农杆菌感受态细胞	20*100μl	420.00
BC304-01	GV3101农杆菌感受态细胞	20*100μl	420.00
农杆菌电转感受态细胞
货号	产品名称	规格	价格
BC305-01	LBA4404农杆菌电转感受态细胞	20*50μl	420.00
BC306-01	AGL1农杆菌电转感受电转态细胞	20*50μl	420.00
BC307-01	EHA105农杆菌电转感受态细胞	20*50μl	420.00
BC308-01	GV3101农杆菌电转感受态细胞	20*50μl	420.00