乙型流感病毒(IBV)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法

乙型流感病毒(IBV)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法）反应需注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
特点优势：
1. 特异性：
2. 重现性：
3. 灵敏性：
4. 实用性：
乙型流感病毒(IBV)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法）性能指标：
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
乙型流感病毒(IBV)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法）反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
乙型流感病毒(IBV)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法）相关PCR产品列表：
霍乱弧菌CTX基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
大肠杆菌（O157:H7）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
粘附性大肠杆菌（EAEC）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
侵袭性大肠杆菌（EIEC）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
致病性大肠杆菌（EPEC）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
甲型副伤寒沙门氏菌（SPA）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
沙门氏菌（Spp）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
志贺氏菌（SH）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
痢疾杆菌（SH）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。
CP-3911多瘤病毒（BK） 核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 50T/100T 保存:－20 ℃, 保质期一年。