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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Lung legionella PCR detection kit
- 库存:
18
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
盒
嗜肺军团菌PCR检测试剂盒反应需注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
特点优势:
1. 特异性:
2. 重现性:
3. 灵敏性:
4. 实用性:
嗜肺军团菌PCR检测试剂盒性能指标:
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
嗜肺军团菌PCR检测试剂盒反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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文献和实验,支原体DNA会显示为特异性条带,以此指示支原体的存在。PCR法可以检测大多数支原体,但谨慎起见最好同时使用另一种检测方法来进行验证。 普健生物生产的支原体PCR检测试剂盒(Mycoplasma PCR Test Kit)是一款具有快速、灵敏、特异性高等特点的支原体检测试剂盒,可用于细胞、培养基、动物血清等的支原体检测。本产品通过聚合酶链式反应技术(PCR)特异扩增支原体16s-rRNA 基因保守区域片段进行支原体检测,能够检测包括M. arthritidis, M
基因序列同时PCR扩增的检测方法。两种不同的军团菌(legionella)基因,一为特异嗜肺L基因(mip),另一种为L-5SrRNA基因,通过引物摇摆(staggered)添加进行复合PCR。首先mip引物PCR扩增7个循环,然后加入5SrRNA引物PCR扩增38个循环。加入不同量的LacZ和LacB基因引物进行PCR扩增可以检测大肠杆菌和与人类粪便污染有关的细菌包括E.coli大肠菌、肠源致病沙门氏菌和志贺氏菌。 在复合PCR中,所有引物Ta值应相近。如果两对引物Tq值差异超过±℃10%,会使扩增
【分享】iCubate全自动多重微生物核酸检测系统-----扩增子拯救多重PCR技术(ARM-PCR)
iCubate全自动多重微生物核酸检测系统-----扩增子拯救多重PCR技术(ARM-PCR) 美国iCubate公司研究开发了革新的扩增子拯救多重PCR技术——arm-PCR,成功解决了多重微生物核酸检测中靶点不兼容的问题,并创新性设计了一次性全封闭卡盒,以及配套的卡盒处理仪、卡盒阅读仪和控制软件,整合形成现在的iCubate 全自动多重微生物核酸检测系统。同时,该系统还免费提供一个开放性的多重PCR检测试剂开发平台iCubate 2.0(icubate2.com
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