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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Test kit (pcr-fluorescence probe method) of botulinum toxin B (bl-b) nucleic acid
- 库存:
18
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
盒
肉毒杆菌B型(BL-B)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)反应需注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
特点优势:
1. 特异性:
2. 重现性:
3. 灵敏性:
4. 实用性:
肉毒杆菌B型(BL-B)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)性能指标:
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
肉毒杆菌B型(BL-B)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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牛特定基因序列PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
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牛腺病毒PCR检测试剂盒(荧光定量法) 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
牛锥虫PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
疟原虫PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
诺沃克病毒PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
偏肺病毒PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
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文献和实验末梢分泌能使肌肉收缩的乙酰胆碱,从而达到麻痹肌肉的效果。人们食入和吸收这种毒素后,神经系统将遭到破坏,将会出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状。新西兰乳制品巨头恒天然集团8月3日宣布,旗下部分婴儿奶粉和运动饮料等产品可能 “受到污染”,含有肉毒杆菌。多家食品厂商产品受到影响。RephiLe 技术人员根据《GB/T4789.12-2003食品中卫生微生物学检验肉毒杆菌及内毒素检验》和《SN/T 2525-2010 食品中肉毒梭菌的PCR 检测》总结出了对食品中肉毒杆菌进行初步检验的方法。 一、实验
领域。例如,可以在PCR扩增中用同位素或荧光素等标记引物或核苷,也可以在电泳后用银染或溴化乙锭染色以显示结果。这里将重点介绍最常用的放射性同位素PCR-SSCP法。在进行PCR扩增特定靶基因序列时,利用γ-32P-ATP标记引物或直接在PCR反应体系中加入α-32P-dCTP进行PCR扩增,使扩增产物带有同位素标记物,然后将扩增产物变性为单链进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,放射自显影显示结果。利用引物标记或碱基掺入法使PCR扩增产物带有同位素标记物,均可使产物信号增强几个数量级。二者相比较,前者经济
收到的能量较少。这样可以减少紫外线对核酸的损害,但也会降低凝胶条带的信号。另一方面,透射仪器可为条带提供更高的信号,但由于辐射接近凝胶,会增加紫外线造成的伤害。 图 5. 反射照明器和透射仪 b. 放射自显影法 在放射性核酸的电泳过程中,凝胶电泳后会暴露在 x 射线胶片上,这一过程即称为放射自显影法。条带辐射的强度可用光密度测定来定量。 参考文献 1.Stellwagen NC (1998) DNA Gel Electrophoresis. In: Tietz D (editor
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