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名称:北京豚鼠脏器组织单个核细胞分离液哪里卖
产地:国产|进口
规格:200ml
编号:TH031
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文献和实验(张卓然、孟庆丽、陈琰、陈彦伟) 一、免疫细胞分离技术 1、淋巴细胞的分离 取肝素抗凝血1m1 加Hanks 液1m1 稀释后,沿管壁徐徐滴流叠加盛有2m1 淋巴细胞分离液的试管内(注意勿与分离液混合,然后2000r/min 水平离心20min,管内分为4 层,自上而下依次为血浆,单个核细胞,颗粒白细胞、红细胞。用毛细管伸至单个核细胞层中(位于细胞分离液与血浆的界面上),沿管壁轻轻吸出全部细胞。然后用Hanks 液洗两次
,说明两等位基因均出现C到T的突变,为-159T/T纯合子,无166bp而被消化成较小的片段则为-159C/C的纯合子,出现含166又有酶切片段是-159C/T杂合子 。 单个核细胞的分离:空腹抽取外周全血,用ACD抗凝,小心加在同体积的淋巴细胞分离液上,以500g离心30 min。小心取出离心管,可见离心管中部有一水平的白色混浊区,用1ml移液器小心吸出中间层白色细胞,用PBS/EDTA缓冲液洗涤2次,用ACK缓冲液裂解残留的红细胞。以550g离心10min得到的细胞沉淀即为单个核细胞
,4 ℃ ,避光。抗体浓度配制如前所述。 ⑥PBS洗3次后,用0.5%甲醛固定。方法如前。 (3)用Ficoll—Hypaque 梯度离心法分离出单个核细胞:用此法可以分离骨髓细胞、淋巴结、扁桃体捣碎后的单细胞悬液等。血液标本应有抗凝剂。取血到分离不能超过6h。 ①抗凝全血4~20ml,用等量PBS或Hanks液稀释。 ②稀释血8或40ml置于15或50ml离心管内,4或10ml Ficoll—Hypaque(或者等量的其它分离液,比重为1.007)从离心管底部轻轻加入
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