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文献和实验兄妹连续交配达20代以上的品系称为近交系,其近交系数可达99.8%,亦可用亲子(父女、母子)连续交配20代以上达到近交目的,其近交系数可达99%。但必须用年轻的双亲同其子女交配,而且亲子交配不能同兄妹交配混用。很多学者认为,较大动物的纯种培育很难获得成功,因为成功率低,往往成为经济上的学生负担。例如犬和猫连续兄妹交配20代需经20年左右。鸡和兔亦也花费较长时间。但目前毕竟因研究上的特别需要,已培育出兔、犬、猫、鸡、羊、猎等的若干近交系。有些学者提议:禽类和兔的血缘系数达到80%以上时(相当兄妹交配四
消化法原代培养兔胸主动脉平滑肌细胞用DMEM配0.2%的1型胶原酶(用20的血清的DMEM配可能更好,有类似文献),分装于青霉素小并,每并2-3ml。1只免的胸主动脉置于1瓶消化液中消化,消化约10几个小时(消化程度的把握要体会),离心后,接种(若见细胞量大,成功把握大),绝对静置3天(没必要看,看多了无益),8天可传代。犬胸主动脉平滑肌贴块法——方法成熟,比消化法好控制的多。1、取材过程要快,取好放4度储存的D-hanks液带入超净台,不然先天不足;2、块大小密度影响不是很大(尽量小),关键
下分离。磁性分离方法基本只包括2个步骤:1. 用磁性纳米粒子标记目标分子或细胞;2. 通过磁分离装置分离出目标分子或细胞。利用磁性纳米粒子分离的例子之一是把特异性抗体与磁性纳米粒子结合,可将磁性纳米粒子连接在特定细胞上,外加磁场即可快速将结合磁性纳米粒子的细胞分离或进行免疫分析。这样的方法特异性高、分离迅速、重现性好。又如,将葡萄糖-DEAE包裹在磁性纳米粒子表面,利用带正电荷的DEAE与带负电荷的核酸之间的电荷吸附作用,通过离子交换,在细菌裂解上清中提纯质粒。磁性转染(magnetofection
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