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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Influenza a virus H1-2009 (iav-h1-2009) nucleic acid test kit (rt-pcr)
- 库存:
18
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
盒
甲型流感病毒H1-2009(IAV-H1-2009)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)反应需注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
特点优势:
1. 特异性:
2. 重现性:
3. 灵敏性:
4. 实用性:
甲型流感病毒H1-2009(IAV-H1-2009)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)性能指标:
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
甲型流感病毒H1-2009(IAV-H1-2009)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
甲型流感病毒H1-2009(IAV-H1-2009)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)相关PCR产品列表:
昆虫种属鉴定PCR Mix 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
蜡样芽孢杆菌PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
蜡样芽孢杆菌sleL基因(110bp)常规PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
蓝舌病毒RT-PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
类鼻疽伯克霍尔德菌PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
鲤春病毒PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
立克次体PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
利什曼原虫PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
痢疾杆菌PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
链霉素PCR Mix 6 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
链球菌B族PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
两栖类和爬行类动物种属鉴定PCR Mix 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
淋球菌PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
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甲型流感病毒抗原 (Flu A-Ag) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于检测血清,血浆及相关液体样本中甲型流感病毒抗原(Flu A-Ag) 水平。 实验原理: 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法( ELISA )测定标本中甲型流感病毒抗原 (Flu A-Ag) 。用纯化的甲型流感病毒 抗体 包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中甲型流感病毒抗原 (Flu
检测或定量。另外,这项技术还可以用来检测基因表达差异或不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术,更灵敏,更易于操作。 RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物(GSP)起始。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在最佳条件下进行。cDNA的合成首先在逆转录缓冲液中进行
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