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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
Synthetic MAP peptide derived from human beta-Actin
- 亚型:
IgG
- 克隆性:
多克隆
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
WB, IHC-P, IF/ICC, P-ELISA
- 浓度:
1mg/1ml
- 抗体英文名:
MG7
- 规格:
50ul 100ul 200ul
我公司开发的抗体已被国内外广大科研工作者使用,被称谓:质量信得过产品.
规格价格:100ul 200ul 大包装/询价
说 明 书:咨询客服
研究领域:肿瘤 细胞生物 免疫学 细菌及病毒 细胞表面分子
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应:Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit,
产品应用:WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
抗体的使用和保存方法
抗体,无论是保存还是运输,都要避免反复冻融。反复冻融,冰晶会破坏抗体的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体,从而降低抗体的结合能力,也加快了抗体球蛋白的降解速度。抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果,如果抗体保存得当,Bioss的抗体活性大部分都可以维持数年。下面就给大家讲解下,Bioss抗体的使用和保存方法:
一、收到抗体后的操作
收到Bioss抗体后(大部分抗体是溶液态),请务必在 4℃,12000rpm,离心3分钟,再打开管盖进行分装、溶解和保存(如果抗体体积小于50ul,请延长离心时间至5 分钟,以保证全部抗体均离心下来,干粉状态的同样适用)。Bioss抗体使用特制的储存管,只有在12000rpm 离心3分钟,才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来(即使是在10000rpm离心也会离心不完全,导致出现抗体的量不足的现象)。请按照说明书推荐的保存条件正确保存和使用抗体。
二、抗体的长期保存
对于Bioss大部分抗体,比较合适的保存方式是:分装后保存在-20℃或者-80℃。
(1)对绝大多数Bioss抗体来说,保存在-20℃就完全足够了。
(2)分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。
(3)分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于10ul每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。
(4)复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在4℃,避免再冻起来。
(5)抗体工作液应该当天配制当天用完,4℃保存尽量不要超过1天。
三、抗体的短期保存
大部分Bioss抗体,在4℃短暂保存1~2 周对抗体活性没有影响。如果抗体很快会使用(1~2 周内),推荐在4℃保存,这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害,如果要长期保存,则最好是在-20℃或者-80℃。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体。腹水形式的抗体产品请在收到后立即冻起来,因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4℃保存会导致抗体的降解。
四、抗体的运输条件
一般国内的的运输过程需要2-5天的时间,是在低温4℃的条件下来完成的。 4℃运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻,这就多了一次冻融的过程),所以抗体运输过程中绝对避免干冰运输。
五、抗体的稳定性
(1) 抗体的稳定性是自然界长期进化的结果,抗体是免疫系统中最重要的分子之一,其稳定性是自然进化筛选的结果,在众多物种中,抗体分子形成了保守而稳定的结构。
(2)抗体分子的高Tm值,在室温下,甚至短时间温度达到50~60℃,抗体分子都能维持正确折叠,保持其应有的活性。
(3)抗体的纯度。Bioss采用先进的抗体纯化技术,确保抗体产品的高纯度,保障其抗体产品的稳定性。
(4)抗体的浓度。高浓度的抗体产品可减少容器表面吸附造成的物质损失,高浓度的抗体稳定性更好。Bioss大部分抗体浓度为1mg/ml,抗体纯度高,特异性好,效价更高。
六、关于加入甘油保存
有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20℃会降低冰点,这对很多抗体可能是可行的。加入甘油的溶液不建议在-80℃保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染。
七、关于蛋白保护剂
蛋白在高浓度时更不容易降解(1mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中加入BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。
八、关于Proclin300的使用
为了防止微生物污染,Proclin300经常被加入到抗体中(终浓度0.03% (w/v))。Bioss的绝大部分抗体已经含有了0.03%的Proclin300,在说明书的储存缓冲液中有标明。
九、特殊抗体的保存条件
偶联抗体:所有偶联抗体都需要在棕色管中或使用锡箔纸避光 保存,尤其是荧光抗体,对光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的。
WB对照系统
阳性对照:最好有标准品,或阳性血清、阳性上清。
阴性对照:测血时用相应小鼠未免疫血清,测培养上清,用无克隆培养上清。
空白对照:不加一抗,用1%BSA代替。
无关对照(替代对照):用无关项目一抗,或无关项目的抗体。
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文献和实验指仅对一种抗原决定基的纯粹的抗体。这类抗体不可能通过将抗原 胞的 Hybridoma,在试管内制成了纯粹的单克隆抗体。用某种抗原使动物产生免疫感应,对应于抗原之不同部分可制成各种不同的抗体复合体。然而,因为一个产生抗体的细胞,只能产生一种抗体,所以骨髓肿瘤细胞与产生抗体细胞间的细胞杂种,可形成边产生抗体边增殖的 hybridoma,将每个杂种细胞进行克隆(无性繁殖系)培养,则一个克隆的细胞群只由单种类产生同一抗体的细胞所组成,这样得到的就是单克隆抗体。此抗体在测定
1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体,即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
以单克隆抗体为基础的免疫治疗 第1代单抗诞生于1975年,来源于小鼠的B细胞杂交瘤,称为鼠源单抗。但人的免疫系统会识针对此类识别单抗产生人抗鼠抗体,将其清除出体外而限制了它的应用。随后研制了人源化单抗,并于1988年进行了第1次商业性的临床试验。人源化单抗与鼠源单抗相比,具有以下的优点:特异性较强;不易发生过敏反应及免疫复合性疾病;在人体内维持的时间较长;可制备用于人的抗独特型抗体。制备人源化单抗可以采用人―鼠杂交瘤技术、人―人杂交瘤技术、EB病毒转化技术、EB病毒转化
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