- ¥800 - 1380
- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0228
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pGADT7-AD
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5μg
pGADT7-AD
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0228 | pGADT7-AD | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | LEU2 ,ADH1,T7 |
|---|---|
| 复制子: | 2μ ori,ori |
| 质粒分类: | 酵母系列，酵母双杂交载体 |
| 质粒大小: | 7987bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | LEU2 |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧 LB |
| 表达宿主: | 酵母细胞 |
| 5'测序引物: | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验啦！ 呵呵，以前看到过有人把NOTCH1的intracellular domain连上GAL4-VP16，然后共转UAS-Reporter。相当于一个直接结合的报告基因系统。UAS-Reporter可以改造pG5Luc载体。 NLS序列在pACT的vp16AD或者pGADT7的gal4AD的上游处，都是SV40NLS，说明书上就有。 呵呵，我不知道常用载体里有没有不带NLS的GAL4序列。GAL4-UAS系统思路及经典文献可以参考93年development
构建 ① 设定温度梯度(26-35°C)和时间梯度(12-72 h)，对龙须菜进行高温胁迫。 ② 提取龙须菜总RNA(RNA提取按照Qiagen试剂盒说明书进行，RNeasy Plant Mini Kit，Qiagen)。 ③ 应用SMART技术构建龙须菜高温胁迫表达cDNA文库，3’和5’引物分别加接酶切位点。 4.文库筛选载体构建 将龙须菜高温胁迫表达文库cDNA双酶切，连入同样双酶切的AD 克隆质粒pGADT7中，用PEG/LiAc 转化
作用蛋白的编码基因。也可用于分析鉴定细胞中转录调控因子与顺式作用元件相互作用。 酵母单杂交原理： 将已知的顺式作用元件构建到最基本启动子(minimal promoter，Pmin)上游，把报告基因连接到Pmin下游。将待测转录因子的cDNA与酵母转录激活结构域(activation domain，AD)融合表达载体导入细胞，该基因产物如果能够与顺式作用元件结合，而激活Pmin启动子使报告基因表达。 酵母单杂交体系主要用于分离编码结合于特定顺式调控元件或其他DNA位点
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