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SABC免疫组化试剂盒(小鼠IgG)(FITC荧光/DAB显

色) 蛋白质研究
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  • ¥130 - 1700
  • 百奥莱博
  • 北京
  • QN1220-AJF
  • 2025年07月12日
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      SABC(Mouse IgG)- FITC(POD) Kit

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      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销售SABC免疫组化试剂盒(小鼠IgG)(FITC荧光/DAB显色) 蛋白质研究,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。


    名称:SABC免疫组化试剂盒(小鼠IgG)(FITC荧光/DAB显色) 蛋白质研究
    规格:100T-200T
    编号:QN1220
    品牌:百奥莱博
    英文名:SABC(Mouse IgG)- FITC(POD) Kit
    本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG来源的免疫组化实验.提供DAB及FITC两种显色选项。

    SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶或者FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶与FITC将保证SABC具有很高的敏感性。

    试剂盒组份:
    封闭液(5% BSA)—————————————10ml
    Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液-—————————100ul
    SABC-FITC浓缩液-————————————100ul
    SABC-POD浓缩液—————————————100ul
    稀释液—————————————————30ml
    20×DAB显色液A—————————————1ml
    20×DAB显色液B—————————————1ml
    抗荧光衰减封片剂————————————10ml

    操作步骤:(以石蜡切片热修复为例)
    1、切片常规脱蜡至水。3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC,可省掉此步)。蒸馏水洗3次。
    2、热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
    3、滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
    4、用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37℃ 1小时孵育左右或20℃ 2小时左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
    5、根据使用量,用稀释液将bio-羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul bio-羊抗小鼠IgG浓缩液,混匀即成工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加生物素化羊抗小鼠IgG工作液,20-37℃ 处理30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟。如果用荧光观察,请接步骤6、7,如果用DAB显色,请直接转至步骤8。
    6、根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。
    7、滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
    8、根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。
    9、DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B,混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
    10、苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。

    对于细胞爬片:常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2(如果用FITC,刚可省掉此步)处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
    对于冰冻切片:固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。

    注意事项:
    1、如果用DAB染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01-0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
    2、如果用FITC观察背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗涤2次,然后封片观察。
    3、因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。

    储存条件:-20℃

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    ·CCCP细胞凋亡诱导剂(50mM)
    编号:QN1291
    英文名称:Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone
    规格:100ul
    CCCP是一种质子载体(H+ ionophore),强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用;CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。

    CAS号:555-60-2
    分子式:C9H5ClN4
    分子量:204.62
    储存条件:-20℃保存
    纯度:≥97% (TLC)

    CCCP还具有其他功能:
    1)在牛蛙交感神经方面的实验表明,CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放;
    2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性;
    3)对细胞内钙水平的各种调节效应;
    4)抑制脂肝酶的分泌;
    5)部分抑制pH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。

    本品是溶于DMSO的CCCP溶液,浓度为50mM,体积为100μl(相当于1mg的总量),常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-10(货号:J8050)来进行相关研究。

    使用方法:
    1)收到本品(CCCP,50 mM)后按照10-50µl的小量分装,冻存在-20℃,避免反复冻融。
    2)推荐工作浓度为10-100µM,初次实验可按照1000×稀释起始浓度(如1µl起始母液加入1ml细胞培养液)进行凋亡诱导20min,随后进行JC-1或者JC-10线粒体膜电位丧失检测,呈绿色荧光。

    ·L-谷氨酰胺
    编号:QN0366
    英文名称:L-Glutamine
    规格:25g|100g
    本品用于生化研究,配置培养基添加剂。

    别名:L-谷氨酸酰胺;L-Gln
    CAS号:56-85-9
    分子式:C5H10N2O3
    分子量:146.15
    储存条件:室温干燥保存
    纯度:>98.5
    性状:无色针状结晶。



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