SY0088型CREB-Luc报告基因质粒现货价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售SY0088型CREB-Luc报告基因质粒现货价格，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：SY0088型CREB-Luc报告基因质粒现货价格
规格：1μg
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
CREB报告基因（报告基因质粒）（CREB luciferase reporter plasimd）是用于检测CRE转录活性水平为目的的报告基因。CRE(cAMP-response element binding protein)是一种细胞核内调控因子，它通过自身磷酸化实现调节转录的功能，影响胎儿T细胞的发育、细胞的生存和学习记忆分子神经机制的相关功能。

CREB报告基因主要用于检测细胞中cAMP/PKA信号通路的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

PGMCRE-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个CRE结合位点，可以高灵敏度地检测CRE的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得CRE报告基因更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
1.pGMCRE-Lu可以采用常规转染法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2.CRE的激活剂，可作为CRE报告基因的阳性对照。

储存条件：-20℃。

关于SY0088型CREB-Luc报告基因质粒现货价格的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·零背景TOPO-TA克隆试剂盒
编号：SY0281
英文名称：Zero TOPO-TA Cloning Kit
规格：20T
本试剂盒是利用拓扑异构酶（Topoisomerase）高效快速连接DNA*(代"片")段的原理进一步研发而成，与传统的T4连接酶相比，具有以下优势：
1）快速，仅需1-5分钟即可完成连接反应。
2）高效，无自连现象，阳性克隆率接近100%，无需设置蓝白斑筛选；
3）操作简单，从连接到涂板仅需15-20min。操作过程省去冰浴、热激和1h复苏等。
4）可连接长达10kb目的产物。

产品用途
A尾PCR产物的快速克隆。克隆后PCR产物的快速测序【使用M13F/M13R引物】。

pESI-T vector (30ng/μl)——————20μl
1kb control insert(40ng/μl)——————5μl
10×Enhancer——————20μl

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

·氨苄青霉素钠
编号：SY0287
英文名称：Ampicillin sodium salt
规格：10g
本品为氨苄青霉素钠盐，细胞筛选常用的浓度为50-100μg/ml。Ampicillin，中文名氨苄青霉素，同义名氨苄西林，一种β-内酰胺类抗生素，属于青霉素家族的一员，同样敏感于β-内酰胺酶，后者可裂解氨苄西林的β-内酰胺环。Ampicillin广谱抑制革兰氏阳性菌，阴性菌以及厌氧菌，其抑菌机制在于：干扰青霉素结合蛋白（penicillin binding protein，PBP）活性，PBP参与肽聚糖合成的最后一步，其可催化丙氨酸和赖氨酸残基间形成五甘氨酸交联，此交联维持细胞壁的完整性，并维持细菌的正常生长。另外，Ampicillin仅对生长的大肠杆菌（Escherichia col）具有杀菌作用。

Ampicillin普遍用作细胞培养中的一种选择性抗生素，用于配制含氨苄的LB或LB平板等，也可用于培养细胞的杀菌。Ampicillin抑制革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌，最小抑制浓度（MIC）分别为0.03-3 μg/ml和0.02 - 1.5 mg/ml。高压灭菌的琼脂或培养基需冷却到45-50℃再加入氨苄青霉素溶液，含氨苄青霉素的平板在2-8℃可保存2周。在 37℃培养条件下，氨苄青霉素可稳定3天。




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·第一条链 cDNA合成试剂盒
编号：SY0290
英文名称：First Strand cDNA Synthesis Kit
规格：50T
本试剂盒是基于Reverse Transcriptase，该酶热稳定性提高，在50℃的半衰期超过240min，且可长时间耐受高达55℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录，能稳定可靠地合成cDNA。且Reverse Transcriptase的独特设计，进一步增强了模板亲和力和行进性，使得全长cDNA的合成能力有了大幅度提升，可获得长达20 kb的cDNA，并且对于常见的逆转录抑制物具有更高的耐受度，非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。

本试剂盒包含由总RNA或mRNA合成高质量第一条链cDNA所需的所有成分，并提供两种cDNA合成引物：Random hexamers和oligo（dT）18。合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR、qPCR以及PCR克隆。其中，5×RT Mix包含优化的缓冲体系和dNTP； Enzyme Mix包含Reverse Transcriptase和RNase inhibitor。可根据需要，选择Oligo (dT)18、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。

试剂盒组分：

组份	规格
RNase free ddH2O	1 ml
5×RT Mix	200 μl
Enzyme Mix*	50 μl
Oligo dT18 (0.5 μg/μl)	50 μl
Random hexamers (N6)	50 μl
*包含RNase inhibitor，用于抵抗环境和体系中可能存在的痕量的RNase。

储存条件：-20℃，有效期一年。

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留。
功能检测1：以500 ng mouse total RNA为模板，Oligo dT18为引物，50℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增nebulin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的20.0 kb条带。
功能检测2：以100 pg Hela cell total RNA为模板，Oligo dT18为引物，50℃反应30分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。
功能检测3：以500 ng Hela cell total RNA为模板，Oligo dT18为引物，55℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。
功能检测4：以1 pg-1 µg HeLa cell total RNA为模板，以Oligo dT18和Random hexamers为引物，测试qRT-PCR性能。

以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线，R2>0.990，斜率在-3.20到-3.60之间。

客户需要准备的材料
1.RNase free的1.5 ml微量离心管或0.2ml PCR管
2.水浴锅或PCR仪
3.冰
4.RNA（高质量的完整的RNA对于获得高质量的cDNA是至关重要的。

引物选择
1） 如果模板为真核生物来源，建议选择Oligo dT18，其与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对，可获得最高产量的全长cDNA。
2）基因特异性引物 (GSP)的特异性最高。但有些情况下，用于PCR反应的GSP无法有效引导第一链cDNA合成。这时，可改用Oligo dT18或Random hexamers重新进行逆转录。
3）Random hexamers特异性最低，所有RNA，包括mRNA、rRNA、tRNA均可以作为Random hexamers的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高，或者模板为原核生物来源，使用Oligo dT18或基因特异性引物 (GSP)无法有效引导cDNA合成时，可使用Random hexamers为引物。

应用实例

1 第一条链cDNA合成*（以20μl反应体系为例）
1）按照下表在RNase free离心管中配制如下混合液：

RNase free ddH2O	to 20 μl
Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)	1 μl
or Random Primer	or 1 μl
or Gene Speicific Primers	or 2 pmol
5×RT Reaction Mix	4 μl
Enzyme Mix**	0.8-1μl
模板RNA	Total RNA: 50 ng-5 μg/mRNA: 5-500 ng

*可选步骤（一般不需要）：如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却 5min，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
** Enzyme Mix非常粘稠，溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请瞬时离心后使用，并且避免吸头外壁沾附损失。可每次按照0.8μl使用，不会影响使用效果。

2）用移液枪轻轻吹打混匀。
3）如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP)，42℃孵育30-50min。
如用Random Primer，25℃孵育10 min，42℃孵育30-50 min。
4）65℃加热15 min(或者85℃加热5 min)失活Reverse Transcriptase。

2 RT-PCR
建议取1/10-1/5 体积(2-4 μl)的反转录产物作为PCR模板。
1）建议反应条件

Components	Volume	Final Concentration
cDNA Template	2 μl	as required
Forward Primer (10 μM)	1 μl	0.2 μM each
Reverse Primer (10 μM)	1 μl	0.2 μM each
10×Taq Buffer (含Mg2+)	5 μl	1×
2.5 mM dNTPs	4 μl	0.2 mM
Taq DNA Polymerase	0.5 μl	2.5 units
ddH2O to final volume	50 μl	Not applicable

注意事项
1）所有操作均应在冰上进行。
2）除使用RNase free的枪头和离心管外，RNA实验用的试剂建议专用，并在单独的洁净的区域操作。操作时，戴上口罩和一次性手套，避免说话。总RNA提取完成后，建议取少量跑1%琼脂糖凝胶电泳，检验RNA的完整性。
3）逆转录反应抑制物包括酚，盐，SDS，EDTA等。建议用75%乙醇 (用DEPC水配制)仔细洗涤RNA沉淀 (轻弹管底让沉淀悬浮，并静置数分钟)。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。






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·Cy3标记兔抗绵羊IgG(H+L)
编号：SY0717
英文名称：Cy3-AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L)
规格：100μl
本品是由Cy3标记的兔抗绵羊IgG（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从兔抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的绵羊IgG分子，也会与其他绵羊免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应，但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Cy3最大激发波长（Amax）为550nm，最大发射波长（Emax）为570nm。本品适合做单标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。要做多标（multiple-labeling）实验，建议使用与相近物种血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸钠，0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
防腐剂：0.025% 叠氮化*(代"钠")
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

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