YT™免疫染色一抗稀释液库存

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售，产品线涵盖YT™免疫染色一抗稀释液库存在内的细胞生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：YT™免疫染色一抗稀释液库存
英文名：YT™ Primary Antibody Dilution Buffer for Immunol Staining
品牌：百奥莱博
编号：YT887
产地：国产|进口
本品是最新一代的高效一抗稀释液，总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、血清等的一抗稀释液，可以用于免疫荧光(Immunofluorescence, IF)、免疫组化(Immunohistochemistry, IHC)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry, IC)等免疫染色时一抗的稀释和配制。

YT™免疫染色一抗稀释液可以有效节约一抗。本产品稀释和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于6个月，并且可以反复多次用于免疫染色，利于节约一抗。

YT™免疫染色一抗稀释液稀释的一抗孵育后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白，确保极高的信噪比。

YT™ 免疫染色一抗稀释液兼容性好。后续兼容辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)和生物素标记的二抗。本产品不含生物素，不会干扰基于生物素的检测。

YT™ 免疫染色一抗稀释液使用便捷。本产品无需添加任何额外的试剂，可以直接用于一抗的稀释。


图1. YT™免疫染色一抗稀释液用于免疫荧光(IF)和免疫细胞化学(IC)的检测效果图。上图为HeLa细胞用一抗α-Tubulin Rabbit Polyclonal Antibody，和二抗Cy3标记的山羊抗兔IgG(H+L)进行荧光染色(左图)或二抗辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L)并用DAB显色(右图)的检测效果图。左图中可见非常清晰的红色荧光的微管形态，右图中可见非常清晰的棕色微管形态。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

按照每次一抗稀释需要5-10ml一抗稀释液计算，一个包装的YT™免疫染色一抗稀释液可以稀释10-20次一抗。

注意事项：
1. 为进一步提高信噪比，推荐同时使用YT™免疫染色封闭液(YT886)、YT™免疫荧光染色二抗稀释液(YT888)和YT™免疫组化染色二抗稀释液(YT889)用于封闭及二抗的稀释。
2. 为了能使稀释的一抗可以反复多次使用，一抗孵育结束后稀释的一抗应立即存放在4℃，以便于后续重复使用。

储存条件：4℃，有效期一年。

我公司的YT™免疫染色一抗稀释液库存，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销售下列产品：

·AP2凝胶迁移探针(10μM)
编号：YT199
英文名称：AP2 Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的AP2结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应，每次标记的探针可以测定约100个样品；或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition)，可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

AP2 consensus oligo的序列如下：
5"-GAT CGA ACT GAC CGC CCG CGG CCC GT-3"
3"-CTA GCT TGA CTG GCG GGC GCC GGG CA-5"

本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记，也可以用于生物素标记。

注意事项：避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·C端His标签融合蛋白质粒
编号：YT471
英文名称：C-His plasmid（with CMV promoter）
规格：1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和His tag(His标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5"端含有一个可以编码His标签的序列，因此可以表达出含有His标签的融合蛋白，可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
multiple cloning site	680-740
c-His tag	741-758
T7 promoter and T7 primer binding site	811-832
SV40 polyA signal	844-1227
f1 origin of ss-DNA replication	1365-1669
bla promoter	1694-1818
SV40 promoter	1838-2176
neomycin/kanamycin resistance ORF	2211-3002
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3003-3461
pUC origin	3590-4257

本质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。


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·磷酸化CENP-A(Ser7位点)抗体
编号：YT661
英文名称：anti-Phospho-CENP-A(Ser7) antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的含磷酸化Ser7的一段人CENP-A多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。

本Phospho-CENP-A(Ser7)抗体识别Ser7被磷酸化的CENP-A，可以检测内源性的Phospho-CENP-A(Ser7)蛋白水平，不识别其它组蛋白，包括histone H3。

染色质结构调控在真核细胞转录和复制的调节中起着重要作用。核小体是染色质的主要构架，由四种核心组蛋白(histones)组成，包括H2A、H2B、H3和H4。除了众多的翻译后组蛋白修饰包括磷酸化、乙酰化和甲基化等机制，细胞中组蛋白和类组蛋白(variant histone or histone like protein)的互换，也可以直接或间接地影响染色质结构。着丝粒蛋白CENP(centromere
proteins)包括CENP-A、CENP-B和CENP-C，是着丝点(kinetochore)的组成蛋白。CENP-A，也称CSE4(capping-enzyme suppressor 4-p)，是重要的类组蛋白，和histone H3的氨基端有62%的同源性，它可以取代着丝粒异染色质上的histone H3，和DNA直接结合。CENP-A和histone H3的氨基端47个氨基酸残基没有相似性，CENP-A的氨基末端可以结合核小体之间的
linker DNA，协助着丝粒异染色质的正确组装和折叠。CENP-A的多种功能受磷酸化调节。CENP-A的Ser7在有丝分裂早期的初始阶段(early prophase)，在histone H3被磷酸化后，可以被Aurora-A和Aurora-B蛋白激酶所磷酸化。CENP-A的磷酸化对于着丝点(kinetochore)正确结合到微管和有丝分裂中染色体的正确排列都是必需的。CENP-A在有丝分裂后期的初始阶段(early anaphase)，在histone H3去磷酸化之前，会被去磷酸化。CENP-A和histone H3磷酸化的时间差异，提示两者尽管有非常相似的磷酸化位点，但它们的生物学功能是有所不同的。CENP-A敲除小鼠会出现严重的有丝分裂缺陷，导致胚胎致死，通常不超过胚胎发育的第6.5天。

组份：
Phospho-CENP-A(Ser7)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

免疫原种属：人
免疫原：人工合成的含磷酸化Ser7的一段人CENP-A多肽
宿主：兔
用途：WB,IP,IF
交叉反应性：人，猴
CENP-A分子量：～17kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:25),IF(1:100)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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