北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒销售

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒销售，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒销售
规格：50次
产地：国产|进口
英文名：Tissue Cells RNA/DNA/Protein Isolation and Extraction Kit
品牌：百奥莱博
本试剂盒用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和总RNA和Protein。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶，然后裂解混合物DNA/RNA/Protein同时通过一个基因组DNA吸附柱，基因组DNA被吸附而RNA/Protein穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于RNA吸附柱上， 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的RNA。滤液经选择性沉淀得到Protein。无苯酚、氯*(代"仿")DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的RNA/基因组DNA纯度高，互不干扰。得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。

试剂盒特点：
1.完全不使用有毒的苯酚，氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速，简捷，单个样品RNA/基因组DNA/Protein分离操作一般可在1小时内完成。
3.试剂盒的独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留，一般情况下得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保RNA/基因组DNA高纯度，可直接用于下游各种实验。

试剂盒组份(50次)：
裂解液RLT——————————————50ml
去蛋白液RW1—————————————40ml
漂洗液RW——————————————10ml
RNase-free H2O———————————10ml
70%乙醇———————————————9ml RNase-free H2O(第一次使用前按说明加指定量乙醇)
抑制物去除液IR———————————25ml
漂洗液WB——————————————15ml
缓冲液APP——————————————60ml
洗脱缓冲液EB————————————10ml
基因组DNA吸附柱和收集管———————50套
RNA吸附柱和收集管——————————50套

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3-4x106，组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT 、抑制物去除液IR、去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 该试剂盒如需要用于植物样品有其实多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/RNA/Protein提取，请咨询技术人员，可能需要用到其它试剂。
5. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（ DNase 消化也无法做到100% 无残留）， 本公司的组织/细胞RNA/DNA/Protein分提试剂盒，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA分离清除技术，绝大多数DNA 已经被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提高效果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。

储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒|核酸蛋白分离提取试剂盒

北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒销售极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)
编号：ALH158
英文名称：Cells/Tissue Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder，通过选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder，最大限度的减少了基因组DNA对凋亡DNA ladder的观察干扰，因此显著的提高了检测敏感度，反应可在微量离心管进行，2.5小时完成，快速方便；无需有机抽提，检测灵敏度极高，可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5～10×10^5 个，但投入的细胞量可在1×10^5～5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1～2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比，整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差往往造成难以准确取材，可能显著影响实验结果。但只要组织确实发生凋亡，有经验的用户也可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder

试剂盒组份(50次)：
Extraction buffer ———10ml
10%SDS—————————1ml
Enzyme A————————1ml
Enzyme B————————1ml
Precipitant ——————7ml
为保持活性方便运输，Enzyme B 客户收到时为冻干粉，收到后加500μl 灭菌水（25 次）或者1ml 灭菌水（50次）溶解后－20℃保存。Enzyme A 和Enzyme B 为酶溶液，应该避免反复冻融降低活性，如果要分多次使用，最好按照每次使用量分装后－20℃保存。

注意事项
1. 溴化乙锭染色过度将降低DNA条带检测灵敏度，可用水冲洗凝胶10～30分钟。如冲洗过头可再用溴化乙锭复染。可用更灵敏的DNA染色剂SYBR Green。也可进行丙烯酰胺DNA凝胶电泳和DNA银染。
2. 对细胞进行干预处理后，凋亡可能仅在某一时间点或某一干预强度下最为明显。需要进行预试验确定最佳干预时间或强度。此时也可用凋亡小体/hoeschst染色试剂盒(ALH160)快速染色凋亡小体观察。
3. 推荐起始细胞量为5～10×10^5 个，但投入的细胞量可在1×10^5～5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1～2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。六孔板的一个孔相当于一个35 mm培养皿长满后可得到1～10×10^5 个细胞，如果细胞凋亡发生率为10%，经过处理可得到约1～10×10^4个凋亡细胞，应该足以获得清晰的凋亡DNA ladder。反之如果不能从＞3×10^6个细胞获得清晰的凋亡DNA ladder，表明其中凋亡细胞少于1%。此时增加细胞用量也难已奏效。
4. 从组织块提取凋亡DNA ladder。取10～20 mg组织块放入小玻璃匀浆器，加100～200μl Extraction buffer，上下手动匀浆15～20次。取出匀浆液，冰上5～10 min。振荡10秒。4500 rpm 10分钟收集上清液并转移到新1.5ml离心管，执行提取步骤3。另外一种方法是将30～50mg组织剪碎后在PBS里面匀浆，制成细胞悬液，离心收集细胞后接步骤2继续执行提取。
5. 采用高质量琼脂糖，使用宽度较小和厚度较窄的样品梳子，制作较薄的琼脂糖凝胶(厚度约2～4 mm)；用较低的电压进行慢速电泳，将显著增加凋亡DNA条带检测灵敏度。电泳距离不要太长，否则将使小的凋亡DNA条带弥散而降低分辨率。


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·DNA消化试剂盒(DNase I)
编号：ALH044
英文名称：DNA digestion kit
规格：1500U
Dnase I中文名称为脱氧核糖核酸酶I，是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物，5"端为磷酸基团，3"端为羟基。DNase I活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。

经过本试剂盒独特的反应液消化后不需要繁琐的苯酚/氯*(代"仿")抽提灭活，可直接用于反转录反应，使用起来非常快速方便。

活性单位：37℃ 10分钟内，将能够完全降解1μg pBR322 质粒DNA 所需的酶量定义为1 个活性单位。
来源：大肠杆菌表达的31kd 重组蛋白。
酶贮存缓冲液：50 mM Tris-HCl (pH7.5)，10 mM CaCl2，50% (v/v)glycerol。
10×DNase Buffer：100 mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃)，25 mM MgCl2，1 mM CaCl2。
纯度：不含其它DNA 内切酶和外切酶，不含RNA 酶。
适用范围：制备不含DNA的RNA样品； RT-PCR反应前RNA 样品中去除基因组DNA 等可能的DNA污染；体外T7,T3,SP6等RNAPolymerases催化的RNA 转录后去除DNA模板；DNase I footprinting 研究DNA-蛋白质相互作用；缺口平移(nick translatioin)；产生DNA 随机片断文库；细胞凋亡TUNEL 检测中部分剪切基因组DNA 作为阳性对照。

反应体系与条件：
1.在RNAse free 管里面加入以下成分
RNA：＜3μg (＜8μl)
10×DNase Buffer：1μl
DNase I：1μl
RNase free water：Up to 10μl
2. 37℃孵育30分钟。
3. 加1μl EDTA Stopper。
4. 65℃孵育10 分钟，灭活DNase I。
4. 取适量或者全部10μl 的处理过的RNA 直接用于反转录。

注意事项：
每μl DNase I 最多处理不超过3μg RNA。如果需要RNA 较多，需要根据RNA 的处理量按比例放大DNase I、10×DNase Buffer 使用量和反应体积。如果处理后需要得到纯净RNA，可以使用RNA 清洁纯化试剂盒在第2 步后（37℃孵育30 分钟后）直接清洁纯化（不需要加EDTA Stopper 和65℃孵育10分钟的步骤了）。


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