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-20℃
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长期
- 英文名:
Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
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714
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京小牛肠碱性磷酸酶厂家在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京小牛肠碱性磷酸酶厂家
编号:SY0388
产地:国产|进口
英文名:Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
规格:1000U
品牌:百奥莱博
本品为小牛肠来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团,因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板,以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。
来源:携带小牛肠碱性磷酸酶表达质粒的酵母
质量控制(Quality Control):无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染
热灭活(Thermal Inactivation):在螯合剂存在下,65℃加热30min,99%活性不可逆丧失;使用苯酚,可使酶完全失活。
储存液条件(Storage conditions):10 mM Tris-HCl (pH8.0), 1 mM MgCl2, 50mM KCl, 0.1 mM ZnCl2, 50% glycerol.
活性定义:在pH9.8, 37℃条件下,以对硝基苯酚磷酸盐(p-nitrophenylphosphate)为底物,1分钟生成1µmol硝基酚(p-nitrophenol)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。
最佳pH(Optimal pH):该酶在底物浓度高的情况下其最佳反应pH为10,在底物浓度低时,最佳pH为8,此时该酶活性较高浓度底物时稍低。
优化体系(Optimal Buffer):AP Buffer (500 mM Tris-HCl, pH9.0; 10 mM MgCl2)
储存条件:-20℃
使用方法:
1 DNA去磷酸化
① 在1.5ml离心管中加入下列试剂:
无菌ddH2O————Up to 50µl
DNA 片段*————1-20pmol
Alkaline Phosphatase————1-2µl
10×AP buffer————5µl
【*】:单链DNA或含5’端突出末端的DNA推荐低温下孵育,平末端DNA或含3’突出末端的DNA建议在较高温度下孵育。
② 混匀上述试剂,于37℃或50℃孵育30min。或者37℃孵育15min后,再于50℃孵育15min。
2 酚氯*(代"仿")法抽提DNA
① 苯酚/氯*(代"仿")/异戊醇(25:24:1)抽提2次。
【注】:推荐在酚提取前将其在含5 mM EDTA, 0.5% SDS ,50 μg/ml Proteinase K的溶液中56℃孵育30min以彻底灭活碱性磷酸酶。在酚提取前于75℃孵育10min,灭活效果更佳。
② 氯*(代"仿")/异戊醇(24:1)抽提。
3 乙醇沉淀DNA
① 加入2.5µl 3M NaCl(终浓度150mM).
② 加入125µl(2.5倍体积)预冷乙醇,混匀后于-20℃放置30-60min,沉淀DNA。
4 溶解DNA
离心,彻底去除乙醇后,将DNA溶于适量去离子水(<20µl)。
北京小牛肠碱性磷酸酶厂家极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·GCNF-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0129
英文名称:GCNF Luciferase Reporter Plasmid
规格:1μg
GCNF-Luc荧光素酶报告基因质粒(GCNF luciferase reporter plasmid)是用于检测GCNF转录活性水平为目的的报告基因。GCNF(germ cell nuclear factor)是核受体超家族成员之一,GCNF主要功能是抑制基因表达,它可以促进Oct-4基因的甲基化,使Oct-4发生基因沉默.GCNF基因高度表达在发育中的神经系统、胎盘、发育中的生殖细胞.GCNF基因表达具有的时空特性,提示GCNF在胚胎发生以及配子形成过程中发挥着重要作用.
GCNF-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Germ Cell Nuclear Factor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。
pGMGCNF-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个GCNF结合位点,可以高灵敏度地检测GCNF的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得GCNF报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

使用说明
pGMGCNF-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
北京小牛肠碱性磷酸酶厂家关键词:Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CI,SY0388,小牛肠碱性磷酸酶
·Alexa Fluor 488标记驴抗鸡IgY(H+L)
编号:SY0740
英文名称:Alexa Fluor 488 AffiniPure Donkey Anti-Chicken IgY (H+L)
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 488标记的驴抗鸡IgY(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的鸡IgY分子,也会与其他鸡免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠和绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理,ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应,但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Alexa Fluor 488的光谱性质同FITC,Amax(最大激发波长)为493nm,Emax(最大发射波长)为519nm。本品适合做多标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。
浓度:0.75 mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸钠,0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐剂:0.025% 叠氮化*(代"钠")
荧光素:Alexa Fluor 488, Amax=493nm; Emax=519nm
推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
北京小牛肠碱性磷酸酶厂家关键词:Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CI,SY0388,小牛肠碱性磷酸酶
HC0038 黑色酶标板(不可拆)25块/包
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京小牛肠碱性磷酸酶厂家。
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文献和实验-HCV CP10单克隆 抗体(McAb)(本实验室提供),抗-HCV NS3和抗-HCV NS5 McAbs(北京医科大学肝病研究所提供),链霉菌亲生物素蛋白过氧化酶连接法(SP法)试剂盒(福州迈新生物技术开发公司提供)。实验中用已知HCV抗原阳性肝组织切片作阳性对照,用狂犬病尸解肝外组织1%小牛血清白蛋白替代第一抗体、磷酸盐缓冲生理盐水替代试剂等作阴性对照。结果,9例共32份肝外组织中6例共21份检出HCV抗原。肾、心、胰腺和肠等组织的检出率分别为66.7%(6/9)、55
对底物作用后生成产物量的测定进行试验。 国外很多ELISA试剂采用碱性磷酸酶(AP)作为标记酶。常用的AP有两个来源,分别从大肠杆菌和小牛肠膜中提取。不同来源的酶生化特性特性略不相同,从大肠杆菌中提取的AP分子量为80000,酶作用的最适合pH为8.0;用小牛肠膜中提取的AP分子量为100000,最适pH为9.6。在ELISA中,AP系统的敏感度一般高于HRP系统,空白值也较低,但AP价格昂贵,制备结合物所得率也较HRP低。 3.2.2 抗原和抗体 制备结合物时所用抗体一般 均为纯度
oryzae)中分离的高度单链特异的外切酶。 活性:可以降解单链DNA或RNA或双链的单链区。 其主要用途有: ⑴ 在cDNA合成过程中,切开cDNA的发夹末端; ⑵ 载体构建过程中,切去DNA片段的单链尾巴, 形成平末端结构。 (三)碱性磷酸酶 从大肠杆菌中分离的细菌碱性磷酸酶(Bacterial Alkaline Phosphatase)简称BAP。 从小牛肠中分离的叫小牛肠碱性磷酸酶( Calf
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