北京现货Rb-GFP报告基因质粒促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售北京现货Rb-GFP报告基因质粒促销，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货Rb-GFP报告基因质粒促销
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：1μg
英文名：Rb GFP Reporter Plasmid
编号：SY0202
Rb-GFP报告基因是用于检测Retinoblastoma protein转录活性水平为目的的报告基因。Retinoblastoma protein(Rb)是一种肿瘤抑制蛋白，在多种癌细胞中是发生功能障碍的。Rb是通过抑制处于分裂期细胞的细胞周期进程阻碍细胞的过度增殖。

RB-GFP报告基因主要用于检测细胞中cell cycle信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMRB-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个RB结合位点，可以高效地检测RB的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得RB-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM Rb -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMRb-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

北京现货Rb-GFP报告基因质粒促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
ARB10271 人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa测定使用说明书 Human interferon-inducible protein 10,ip-10 ELISA KIT
ARB11701 人硫酸褪黑色素(MS)Elisa方法检测 Human melatonin sulfate,ms ELISA KIT
ARB12095 大鼠心肌营养素1(CT-1)尿液中含量检测 Rat cardiotrophln 1,ct-1 ELISA KIT
PY02-212 亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础 250克
ARB10462 人生长激素释放多肽(GHRP)定量分析 Human growth hormone releasing Peptide,ghrp ELISA KIT
ARB12979 小鼠纤连蛋白(FN)检测服务 Mouse fibronectin,fn ELISA KIT
BTN130629 RecJf核酸外切酶 RecJf Exonulease
BL1348 TMB单组分显色液
ARB12318 大鼠低密度脂蛋白(LDL)免费代测 Rat low density lipoprotein,ldl ELISA KIT
10035-04-8 Calcium Chloride　 氯化钙
硫酸铝钾 PMBP 7784-24-9
ARB11750 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3(EAR3)elisa检测操作说明书 Human eosinophIL-associated ribonuclease a family member 3,ear3 ELISA KIT
SJ0245 Doxycycline-HCL 盐酸强力霉素
PY01-108 七号胆盐 25克
ARB10308 人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)elisa检测说明书 Human macrophage inflammatory protein 5,mip-5 ELISA KIT
ARB12454 大鼠促甲状腺素(TSH)检测服务 Rat thyroid stimulating hormone,tsh ELISA KIT
BFD069 鸡禽流感抗体检测卡
北京现货Rb-GFP报告基因质粒促销关键词：SY0202,Rb GFP Reporter Plasmid,Rb-GFP报告基因质粒


·Rosseta(DE3)感受态细胞
编号：SY0016
英文名称：Rosetta(DE3) Competent Cell
规格：10×100μl
本品是在具有大肠杆菌BL21菌株基础上制备的化学转化感受态细胞，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子（AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA）对应的tRNA，提供外源基因（尤其是真核基因）在原核系统中的表达水平。经pUC19质粒检测，转化效率可达10^7 cfu/μg。本品具有氯霉素抗性。

注意事项

1）感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用，避免反复冻融。
2）待转化DNA加入感受态细胞后，请勿用移液枪吹打，轻轻弹匀即可。
3）为确保最高效率转化，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。
4）本品应于-80℃保存，请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。
5）整个转化过程请于无菌条件下操作。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1）将感受态细胞从-80℃中取出，置于冰水浴中融化。
2）将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。
① 通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和；
② 待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
3）42℃水浴，不要晃动，准确热激45s后，立刻置于冰水浴中，静置2-3分钟。
4）向离心管中加入900 μl 不含抗生素的LB或SOC培养基，混匀。
5）150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。
6）取适量已转化细胞，加到含相应抗生素的固体培养基上，轻轻涂匀。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。
【注】：如菌体量较少，也可2,500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。
7）室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。

储存条件：-80℃


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·通用型动物组织PCR试剂盒
编号：SY0049
英文名称：Animal Tissue Direct PCR Kit
规格：50T|200T
该试剂盒可用于转基因型鉴定、动物基因分型等多种大规模基因检测。动物组织直接PCR试剂盒是一种可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系，可以简便快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA及其它次生代谢物，也无需有机溶剂抽提，即可得到质量稳定的基因组DNA，无需后续纯化步骤即可直接用于PCR反应。而且样品需求量小，少到5mg动物组织即可进行实验。

试剂盒中提供的 2×Tissue Master Mix 具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合物，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，并以dUTP替代了dTTP，另外加入了能够降解含有dUTP 模板的 UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物，UNG 酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。优化的2×Tissue Master Mix与直接裂解液配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、兼容性强、特异性强、稳定性好等特点。

产品组分：

组分	50T	200T	储存
2×Tissue MasterMix*	500 μl	1 ml×2	-20℃
Buffer AL	5 ml	20 ml	室温或4℃
Protease	220 μl	880 μl	4℃
6×DNA Loading Buffer	1.5ml	1.5ml	4℃

注：2×Tissue Master Mix中包含Tissue Taq DNA 聚合酶、UNG酶、dNTP（dUTP替代了dTTP）、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂和稳定剂。

保存方法
① 本试剂盒的2×Tissue Master Mix保存在-20℃，避免反复冻融。
② Buffer AL在常温干燥条件下，可保存12个月，如需保存更长时间可置于4℃。
③ Protease溶液具有独特配方，常温保存（25℃）可长期具有活性，在4℃保存，其活性和稳定性会更好，因此建议将其置于在4℃保存，请勿置于-20℃保存。

注意事项
1）本试剂盒适用于常规PCR，请勿用于多重PCR鉴定；建议扩增片段在1kb以内。
2）注意实验用具的清洁以及实验的操作手法，避免样本间的交叉污染。
3）建议采用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。
4）Buffer AL若低温保存，容易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀，混匀后再使用。
5）电泳检测时，切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。
6）建议设立阳性及阴性对照反应。阳性对照可用50ng纯化的动物DNA为模板，阴性反应以ddH2O为模板，引物可采用以前成功扩增的引物。
7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法

1. 取5-10mg动物材料，置于离心管中。尽量剪碎动物材料，以使之后的酶解反应容易进行。
2. 取100μl Buffer AL并加入4μl Protease，涡旋混匀。
3. 向混合液中加入动物组织，涡旋混匀。
4. 65℃孵育10-30min，然后95℃处理5min。
【注】：65℃孵育，一般只需10min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难酶解，可以将时间延长至30min。组织块不需完全酶解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
5. 12,000 rpm (~13,400×g )离心5min。
6. 转移上清至新的离心管，4℃或-20℃放置备用或直接用于PCR扩增。
【注】：用于后续PCR检测时，模板量占PCR体系的1-10%之间最佳，不能超过20%。如50μl 的PCR体系中，加入0.5-5μl 裂解液即可，但不能超过10μl。
7. PCR反应体系配制*
按照下表配制PCR反应体系，配置好反应体系后，短暂涡旋充分混匀并瞬时离心，将所有试剂收集到管底。

ddH2O	Up to 20μl
2×Tissue Master Mix	10μl
正向引物（10μM）	0.5μl
反向引物（10μM）	0.5μl
模板 DNA	xμl

【*】：① 配制的PCR反应体系可根据所需终体系（如50μl）按照该比例进行调整。
② 通常引物终浓度为0.2-0.25μM可以得到较好结果。反应性能较差时，可以在0.1-0.5μM范围内调整引物浓度。
8. PCR反应条件设置
此表PCR反应条件仅供参考。PCR反应条件因模板、引物等的结构条件不同而各异。具体操作中需要根据模板类型、目的片段大小、扩增片段的碱基序列和引物的GC含量及长短等具体情况来优化最佳的反应条件，包括退火温度，延伸时间等。

循环步骤	温度	时间	循环数
UNG酶处理	50℃	5min	1
灭活UNG酶&预变性	94℃	5min	1
变性	94℃	10sec	30-40循环
退火a	50-65℃	20sec
延伸b	72℃	30 sec/kb
彻底延伸	72℃	5min	1

【注】：a. PCR程序中的退火温度需根据引物的Tm值自行设置；
b. 延伸时间需要根据片段的长度来确定，对于1kb以内的DNA*(代"片")段，建议延长时间为30秒。

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