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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pET30a-EcoRV
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pET30a-EcoRV
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0449 | pET30a-EcoRV | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | T7/lac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori,F1 ori |
| 终止子: | T7 terminator |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体;PET系列表达质粒 |
| 质粒大小: | 5248bp |
| 质粒标签: | C-6×His |
| 原核抗性: | 卡那霉素Kan |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | BL21(DE3) |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
| 3'测序引物: | T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验用于克隆筛选).因为引物上带了EcoRV位点,又可以进一步做成T载体,再把基因克进去,如此反复... 关键是T载体要制备的好,筛选的时候多挑几个克隆,如果需要定向克隆基因的话可利用载体上的引物筛选之,然后利用基因内部合适的酶切位点来验证... 欢迎交流! qianjing930 我做过三段重复片段的串联,用的是pBV220载体. 第一对引物为EcoRI_KpnI_____BamHI;第一段单体插入pBV220载体中的EcoRI
μM)5μlNaCl 100 mM(终浓度)Tris‐Cl pH7.4 50 mM(终浓度)加水补足 50 μl将配制好的退火反应缓冲液重复混合,短暂离心后放置 PCR 仪上,运行以下程序: 90℃ 4 min, 70℃ 10 min, 55℃ 10 min, 40℃ 10 min, 25℃ 10 min。退火后的寡核苷酸可以立刻使用或者在 ‐20℃ 长期保存。三、 pCas9/gRNA 基因敲除载体的构建用 EcoRV 酶切 2 μg pCas9/gRNA 载体(inovogen)。通常
1.4 利用载体或接头的染色体步行技术 克隆 基因启动子 这类方法的第一步都是酶切基因组 DNA ,连接载体或接头,既可以用pUCl8等质粒载体,也可以使用λ DNA 等噬菌体载体,只要选用的载体带有合适的酶切位点;同样根据实验需要,接头既可以是双链也可以是单链,然后根据基因组 DNA 序列设计的特异引物和载体的通用引物或接头序列进行扩增。 1.4.1 利用载体的PCR Shyamala等利用的单特异性引物PCR (SSP-PCR )对以小鼠
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