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- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0491
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pUC18
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5ug
pUC18
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0491 | pUC18 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | Lac/lac |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体；克隆质粒 |
| 质粒大小: | 2686bp |
| 质粒标签: | LacZ |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 5'测序引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
| 3'测序引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
质粒简介
pUC18是适合于双脱氧法DNA测序的载体，通常运用于重组dna的分子克隆中，首先我们制备大肠杆菌的感受态细胞（能接受外来重组的dna），这种感受态菌株必须不同外来DNA分子发生遗传重组，通常是rec基因缺陷型的突变体，同时它们必须是限制系统缺陷或限制与修饰系统均缺陷的菌株，即具有这三种缺陷（rk mk rec ），同时对氨苄青霉素敏感（ap）。
puc18载体自身带有抗氨苄青霉素基因，而外源片段不具有，这样只有带有puc18的转化子的菌株才能在氨苄青霉素平板上存活，而外源片段自身环化的不能存活，这称为抗性筛选。
pUC18 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 个氨基酸的编码序列，在这个编码区中插有一个多克隆位点，且不影响正常功能，DH5α感受态菌株带有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的编码信息，当puc18载体在正常情况下同感受态菌株融合后，互补表达有活性的β-半乳糖苷酶，称为α-互补现象，当有外源片段插入多克隆位点后，不能产生互补，即细菌不能产生β-半乳糖苷酶活性。在呈色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷酶）和诱导物IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）的存在下，互补产物菌落呈现蓝色，不互补产物菌落呈白色，很容易鉴别，这种筛选方法称为α-互补现象筛选(蓝白斑筛选)。由上可见，puc18载体除了能重组导入外源片段外，在筛选表达过程中还具有重要的作用
质粒图谱
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文献和实验相关专题 那些实验室常用的克隆载体 pUC18 和 pUC19质粒图谱 pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ，是最常用的质粒载体，其结构组成紧凑，几乎不含多余的 DNA 片段，GenBank注册号为 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而来，其中 lacZ (MSC)来自 M13mp18/19 图 3-4 是其质粒图谱 。 这两个质粒的结构几乎是完全
zjf0709 左侧的是提取的PUC18质粒，中间的marker不太好（可以忽略），右侧的marker是DL2000，由于跑得时间过长所以marker跑散了，右侧DL2000最上面的一个条带是2000bp，PUC18的序列是2686bp，为什么会跑的比2000bp还快？这个现象正常吗？是不是超螺旋的问题？请大家帮忙解答，谢谢！！！ zjf0709 自己顶一下，请大家帮忙看一看。 济南基美
基因连接到载体上，需经过一系列酶促反应，涉及几种工具酶，其中最为重要的是两大类酶： ① 限制性内切酶：把载体DNA切开形成平端或粘末端。 ② DNA连接酶：用于连接载体和外源DNA片段。 pUC18/19是常用的质粒载体，其图谱如右所示： pUC18/19的多克隆位点如下所示： 三、实验仪器 离心机移液器16套（每2人1套）
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