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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
EHA101 Strain
- 库存:
20
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
株
EHA101根癌农杆菌
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文献和实验1双元载体的农杆菌转化 1.1农杆菌感受态细胞的制备 1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养。 1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中,220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。 1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中,28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。 1.1.4. 转入无菌离心管,5000rpm离心5min,去上清液。 1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液
的转化方法 1 根癌农杆菌介导转化法 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌。它能在自然条件下感染大多数双子叶植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤(crown gall tumor)。根癌农杆菌细胞中含有Ti 质粒(tumor-inducing plasmid,瘤诱导质粒)。在Ti 质粒上有一段T-DNA(T-DNA region),即转移-DNA(transfer-DNA),又称为T区(T region)。根癌农杆菌通过侵染
双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中,220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中,28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。1.1.4. 转入无菌离心管,5000rpm离心5min,去上清液。1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置
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