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文献和实验检测反应。 因此又制定了方案II 250mL反应器,加入水和二氧六环各60 mL,再加入L-组氨酸(4. 0 g, 25. 78mmol) , 用冰浴冷却至0 ℃,然后加入(Boc)2O (12.376g, 56.71 mmol) ,缓慢加入NaOH溶液,保持容液PH为8~9,自然升至室温,反应20h. 减压去除二氧六环,水相用乙醚提取两次,然后以饱和KHSO4 调节pH = 1~2,乙酸乙酯萃取三次,饱和NaCl溶液洗涤有机相,无水Na2 SO4 干燥,然后减压蒸干,得到淡黄
有的,到时候发给你吧。琼脂糖肯定比纤维素分离效果要好,载量也大,还有就是柱床体积不会变化,流速高。 70) 想请较:质粒纯化中超螺旋和线性的如何实现有效分离(制备规模),且不使用plasmidselect之类亲和介质。 亲和是最有效的方法,我们有现成的工艺,包括去内毒素,你可以把你的邮件pM给我,我给你发一份相关的材料,你可以看看。 71) 我所纯化的蛋白质大概是66kDalton,进行的亲和纯化。现在出现几个问题想请教: 1。用的Ni-NTA进行亲和纯化,以前一直是在250mM咪唑中洗下
3℃载体,BL21表达 你好,我做复性不多,你可以依据有关有多对4对二硫键的蛋白复性的原理看这方面的文献,我看一般有不少用谷胱甘肽氧化型和还原型配比做的,还有用分子伴侣,你可以多看看再尝试:) 至于纯化,如果你的蛋白有游离的巯基,那我觉得很时候用以前的共价层析,专门对于巯基进行纯化,那填料叫71-7105-00 Thiopropyl Sepharose 6B不知道现在还有没有这个填料,你可以问pHarmacia公司的人。你pM给我,我可以把这个材料发给你,如果没有,那你只好用离子交换,凝胶
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