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文献和实验,否则基因组 DNA 裂解成小片段,有可能对质粒造成污染。SDS 作用是结合蛋白质,为下一步做准备。5. 加 150μl 用冰预冷的溶液 Ⅲ,盖紧管口,将管倒置后温和地振荡 10 秒钟,使溶液 Ⅲ 在粘稠的细菌裂解物中分散均匀,之后将管置于冰上 3-5 分钟。溶液 Ⅲ5 mol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 mlTips:这一步主要作用是中和,避免质粒长时间在碱性条件下造成损伤,此时质粒溶解在中和液上清中。SDS 的钾盐是不溶于水的,也直接导致与之结合的蛋白质沉淀,由于基因
结缔组织生化(Biochemistryof Connective Tissue)
多糖主要受组织蛋白酶D等的作用,部分肽链水解产生的带多糖链的小片段可被细胞吞噬,进而在溶酶体中逐步水解成各种单糖及其衍生物。因此,溶酶体是糖胺多糖分解的主要场所。 图13-5 透明质酸的水解 溶酶体中分解糖胺多糖的酶包括内切糖苷酶、外切糖苷酶及硫酸酯酶等。如图13-5所示透明质酸的水解过程:首先透明质酸酶(hyaluronidase)为一种内切酶,能水解透明质酸、硫酸软骨素A和C中的β-N-乙酰氨基已糖糖苷键,产生主要为四糖或六糖的寡糖。随后再由β-葡萄糖醛酸酶及β
连(或其他形式的聚集)增多,但其详细作用机制尚不清楚。 (二)血液的粘滞性 通常是在体外测定血液或血浆与水相比的相对粘滞性,这时血液的相对粘滞性为4-5,血浆为1.6-2.4。全血的粘滞性主要决定于所含的红细胞数,血浆的粘滞性主要决定于血浆蛋白质的含量。水、酒精等在物理学上所谓“理想液体”的粘滞性是不随流速改变的,而血液在血流速度很快时类似理想液体(如在动脉内),其粘滞性不随流速而变化;但当血流速度小于一定限度时,则粘滞性与流速成反变的的关系。这主要是由于血流缓慢时,红细胞可叠连或聚集
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