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文献和实验细菌的数量! 1).将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。 2).继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。 3).继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。 4).重复步骤3再洗。 5).重复步骤3再洗。 6).加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。 7).加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。 8).再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。 9).加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置
miR-21-5p 的水平,数据显示,电转后外泌体中 miR-21-5p 的水平显著高于共孵育后 miR-21-5p 的水平。 图三 qPCR检测外泌体中 miR-21-5p 含量 3)从转染的荧光结果来看,相比空细胞组,外泌体电转 mimic NC 后转染入目的细胞中的荧光强度要明显高于外泌体与 mimic NC 共孵育后在目的细胞中的荧光强度,故 mimics 通过电转进入外泌体的效率要远高于通过共孵育进入外泌体的效率。 图四 外泌体电转和共孵育转染荧光对比 4)从检测目的细胞中 miR
。 14B、随后将新的类器官转移至 1.5ml 离心管中,高速(约 6000g)离心 3-5s,或低速(约 300g)离心 3min。离心后,上皮碎片将沉降到底部,Matrigel 继续悬浮在培养基中,细胞团沉积在离心管底部。 15B、在显微镜下用移液器取出培养基和 Matrigel,向沉淀的细胞团内添加 200μl 新鲜的 Matrigel,混合均匀后在 24 孔板的每个培养孔中心接种 25μl 混合液。待 Matrigel 在 37℃ 培养箱中静置 10min 凝固后,加入 0.5ml 人芽尖
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