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文献和实验wangch84 各位高手，兄弟最近忙于质粒构建，意图将一段长约4000 bp的片段，通过BamH1和EcoR1两个酶切位点连接到pcDNA3.1+载体上。情况如下： 1. 通过LA Taq酶扩增，并纯化回收目的片段（引物中带有酶切位点，保护性碱基＝3，上游带有Kozak序列）；由于回收效率很高，所以在进行下一步双酶切时只加了12 μl的目的片段，H2O 20 μl，10 X K BUFFER 4 μl，两种酶各2 μl，37℃作用过夜（12-14 h
-5.55.15.93.4-3.55.5-5.84.86.05.13.93.7-5.04.6-4.76.5-6.84.8-5.24.7-5.04.0-4.14.55.8-6.03.83-4.411.8-2.75.53.2-3.311.0-11.26.997.077.236.924.6-6.45.64.3-4.54.6-6.29.8-10.14.47-4.575.25.55.45.93.755.36.855.735.351.0左右8.14.97.8 4.584左右
项目正常值红细胞数（×1012/L）8.9（7.2-9.6）血细胞容量值（%）46（39-53）红细胞体积（μm3）55（52-58）白细胞（×1012/L）14（5-25）中性粒细胞（%）22（9-34）嗜酸粒细胞（%）2.2（0-6.0）嗜碱粒细胞（%）0.5（0-5.0）淋巴细胞（%）73（65-84）单核细胞（%）2.2（0-5.0）血小板（×109/L）1240（1100-1380）血红蛋白（g/L血液） （g/L血细胞）148（120-175） 320（300-350）
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