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文献和实验(RNA interference ,RNA i) 通路中,长片断的双链RNA 进入细胞后会被一个类似RNase III 的内切核糖核酸酶(Dicer) 降解为一系列的21―23bp 长度,3’端有两个碱基突出(带羟基)5’磷酸化的siRNA s 。这些siRNA s 介导同源转录本的降解,从而导致基因表达沉默。( 1-5)大肠杆菌Escherichia coli RNase III 参与多种细菌RNA s,噬菌体甚至是质粒来源的RNA s 降解(6-9) ,能够将长片断的双链RNA s降解为一系
引物的3'端向5'端合成的,相邻的核苷酸通过3'→5'磷酸二酯键连接。 第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5'-羟基的保护基团DMT,获得游离的5'-羟基; 第二步,合成DNA的原料,亚磷酰胺保护核苷酸单体,与活化剂四氮唑混合,得到核苷亚磷酸活化中间体,它的3'端被活化,5'-羟基仍然被DMT保护,与溶液中游离的5'-羟基发生缩合反应。 第三步,带帽(capping)反应,缩合反应中可能有极少数5'-羟基没有参加反应(少于2%),用乙酸酐和1-甲基
DNA 链的合成的,合成的方向是由待合成引物的 3′ 端向 5′ 端合成的,相邻的核苷酸通过 3′→5′ 磷酸二酯键连接。第一步是将预先连接在固相载体 CPG 上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其 5′- 羟基的保护基团 DMT ,获得游离的 5′- 羟基。第二步,合成 DNA 的原料,亚磷酰胺保护核苷酸单体,与活化剂四氮唑混合,得到核苷亚磷酸活化中间体,它的 3′ 端被活化, 5′- 羟基仍然被 DMT 保护,与溶液中游离的 5′- 羟基发生缩合反应。第三步,带帽 (capping
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