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文献和实验带有亲水键合相,在较大的流速下能经受高压且有非常高的分离度,尤其适用于蛋白质和腐殖酸的分离。曾有人描述过带羟基、氰基、铵离子及芳基金属醚键合到硅胶上,铵离子键合相主要以氢键结合,通过溶剂作用稳定保留值。 1.4 离子交换色谱 离子交换固定相的确研究过不少,如八十年代初流行的TSK型SW硅胶及基于二乙胺乙基(DEAE)制成的阴离子交换材料用于蛋白质及核酸的优化分离,低聚糖的分离采用Micro-PakAX-5。XAD树脂是色谱中使用最基本的固定相,弱酸、弱碱及两性电解质的分离均有人
)制成的阴离子交换材料用于蛋白质及核酸的优化分离,低聚糖的分离采用Micro-PakAX-5。XAD树脂是色谱中使用最基本的固定相,弱酸、弱碱及两性电解质的分离均有人研究过,反离子以扩散双电层形式存在。也有人制备多孔甲基丙烯酸盐离子交换剂,但多数人愿意使用商品化的交换剂。Sevec和Frechet[5]制得聚甲基丙烯酸缩水甘油酯共聚二甲基乙烯丙烯酸酯色谱柱(300×8mm)用于蛋白质离子交换的制备色谱。他们能做到一次进样到这种色谱柱分离300mg的蛋白质混合物。Gawdzrk和Matynia制备
ECD和戊二醛加入混合液,振摇后计时,用pH计检测,约2~3min时,pH降至6.6,再以1N的NaOH在4min内调pH至7.0,此时,将该混合固定液加入盛有细胞(经PBS漂洗过)的器皿中,在23℃固定7min后,以PBS洗去固定液,即可进一步处理。ECD即乙基-二甲基氨基丙基碳亚胺盐酸盐[1-ethyl-3(3-dimethyl-aminoprpyl)-carboi-imide hydrochloride],简称乙基-CDI,常用于多肽类激素的固定,对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD单独应用
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