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文献和实验过,至于出现这种个体差异性的原因有待进一步研究,分析可能是不同样本NK细胞表面激活受体或抑制受体表达呈现一个特殊性。四个样本PBMC中NK细胞比例分别为23.38%、24.70%、10.59%、9.22%,前两个样本NK细胞比例较高,样本四NK细胞占比例较低,这也可能是扩增倍数出现差异的原因。 为了检测扩增得到的NK细胞的功能,我们选择了K562和RPMI-8226。相同效靶比时,NK细胞对K562的杀伤活性比RPMI-8226要高。RPMI-8226高表达HLA-1分子,对NK细胞的杀伤
法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
Bicinchoninic Acid (BCA) Protein Assay (Smith)
at 562 nm.Color will be stable for at least one hour. Procedure 2 (micro assay) Reagents 1.Reagent A: 8 gm sodium carbonate monohydrate,1.6 gm sodium tartrate,brought to 100 ml with distilled water.Adjust the pH to 11.25 with 10 M NaOH. 2.Reagent B
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