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文献和实验要设立对照。该法可用于多样本、多位点甲基化的检测,样本需要量少,适于临床样本,但存在假阳性问题。 2.2.11 甲基化敏感性斑点分析(methylation sensitive dot blotassay,MS-DBA) G Clément等2005年[43]报道了一种新的方法,能够定量或半定量分析样本中的甲基化水平。这个方法的过程是:先用重亚硫酸盐处理待测DNA片段,随后以非CG区的引物行PCR扩增,将扩增产物变性后转移到尼龙膜上,用3'端DIG标记的含有2个CG(或TG)的双核苷酸探针与DNA
1942年,C.H.Waddington首次提出表观遗传学(epigenetics)的概念,并指出表观遗传与遗传是相对的,它主要研究基因型和表型的关系。几十年后,霍利迪(R. Holiday)针对表观遗传学提出了更新的系统性论断,也就是人们现在比较统一的认识[1],即在不改变基因组序列的前提下,通过DNA和组蛋白的修饰来调控基因表达,这种修饰以DNA甲基化最为常见。继人类基因组计划结束后,2003年人类表观基因组协会(Human Epigenome Consortium, HEC)宣布开始投资和实施
mmol/L d C T P ,400 mm o l/Ld U T P ) 〇(3) 40 m m o l / L p H 8 . 4 Tris - H C l ,100 m m o l / L K C 1,6 mm o l/L MgCl2〇第 15章实质等同性 : 转录组学 ? 207 ■(4) U D G (尿嘧啶D N A 糖基化酶4 0 U / m l ) 。 (5) R O X 参照染料 ( 甘氨酸结合的5- 羧基- X - 罗丹明,琥珀
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