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文献和实验。既然是疏水性很强你可以加点甘油或者乙二醇降低极性,这样溶解就会好得多,此外你也直接加2%的PEG这样也降低极性,同时保护你的蛋白,你再做纯化就可以了,我以前遇到这样的蛋白是用10%的乙醇加3-5%的PEG5000。这样的情况下蛋白还是活性回收率很高,我觉得那些表面活性剂能不用还是不用的好,你失去活性你可以监测一下提取,纯化,酶切到底哪里失去了活性,这样更容易解决你的问题。还有注意缓冲液PH值,看看改变它对溶解度有没有影响。蛋白有沉淀那你可以稍微把蛋白的浓度降低点,这也是个办法。2)请问楼主有没有合成
年来气相色谱柱固定相的研究进展。 1 聚硅氧烷固定相 极性聚硅氧烷固定相主要由在聚硅氧烷侧链上,引入氰丙基、氰乙基或者三氟丙基等极性基团构成,极性基团的强弱及含量对固定相的选择性和在柱壁上的涂渍交联程度有直接影响,例如OV-1701是一种含氰丙基7%、苯基5%的二甲基交联聚硅氧烷,能在未经处理的玻璃及石英毛细管柱上均匀涂渍和交联[1]。 其中y分别为:(1)4-OCH3 (4)3-NO (2)4-CN(5)3,4,5-(OCH3)2 (3)3,4-(OCH
多肽,可选择这两个酸性氨基酸残基的侧链羧基为C端,与PAC(烷氧基苄醇)或PAL(烷氧基苄胺)或其他类型树脂缩合,将线性多肽挂在树脂上。主链羧基用烯丙基保护。逐步接肽完成之后脱去N端和C端保护基,加入缩合剂得到连在树脂上的环合产物。最后用三氟醋酸:茴香硫醚:b-巯基乙醇:苯甲醚混合试剂从树脂上切下环肽,同时脱去其它侧链保护基。采用这种策略完成了Cyclo(Ala-Ala-Arg-D-Phe-Pro-Glu-asp-Asn-Tyr-glu)的合成,收率为71%。这种方法的局限性在于线性多肽前体中必需
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