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文献和实验本方法由Dellaporta,Wood和Hicks(1983)的方法修改而成。其基本原理是研磨的组织细胞用热的SDS裂解后，加入高浓度的KAc，0℃放置以除去蛋白和多糖类杂质，最后用乙醇或异丙醇沉淀。一 材料、试剂和仪器1 材料 新鲜的组织材料或-80℃冻存的材料2 试剂(1)提取缓冲液Tris-HCl 100mmol/L（pH8.0）EDTA 50mmol/L （pH8.0）NaCl 500 mmol/L灭菌后加β-巯基乙醇至10 mmol/L(2)裂解液20%SDS(3)高盐溶液5mol
摘 要 对植物中DNA抽提是在分子水平上对植物进行系统分析与研究的基础性工作.经多次实验，使用改良的CTAB法抽提山茶属植物中总DNA，即在抽提前加入抗氧化剂β-巯基乙醇，并使用冷冻的异丙醇来沉淀DNA， 获得了较好的效果，其纯度和得率完全能满足常规分子生物学操作的要求.关键词 山茶属植物；DNA抽提；叶片；改良CTAB法中图法分类号 Q523；Q949.758.4DNA Extraction From the Leaves of Camellia PlantsTan Xiaofeng Qi
2、有时在使用蛋白酶时，为了抑制核酸水解酶的降解作用，可在蛋白酶缓冲液中用终浓度5mM的EDTA代替NaCL，并且可将反应温度提高到50－60℃，并将反应时间缩短到15－25min，但酶用量必须提高10－20倍。溶菌酶使用时缓冲液中需加EDTA，因游离金属离子对酶有抑制。 3、许多植物材料中富含酚，在细胞破碎时，在多酚氧化酶作用下，被氧化成有色的锟类物资，影响核酸的提取及降低提取质量，在提取液中加入PVP和巯基乙醇对降低酚类的干挠可能有所帮助。PVP将与酚形成复杂的聚合体，在提取时将酚从核酸
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