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上海一基实业有限公司
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文献和实验培养 24 - 48 h,细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基: 待细胞汇合度~50%时,移去原有完全培养基,添加新培养基进行培养,新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成; 待细胞生长汇合度约为70-80%时,移去培养基; 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次; 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h,待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液,该上清液即可用于外泌
gel electrophoresis. Protocol 1. Prepare an early log phase culture of JM101 by inoculating an Ehrlenmeyer flask containing 50 ml of 2xTY with a glycerol stock of JM101 and pre-incubating for 1 hour in a 37degC water bath, with no shaking
我们选取几种常见的样本分别介绍样本处理的要求: 细胞培养上清:选用这种样本的优势是不会受到样本量的限制,但是需要注意以下几点:一是一定不能添加含有外泌体的 FBS;二是细胞一般培养 24-48h 后即可分离外泌体;三是注意细胞不允许有污染、细胞死亡率要控制在 5% 之内。 血清/血浆:选用血液作为样本时,要注意血清和血浆的区别。血清是血液凝固之后收集的液体,如果研究与血小板相关的疾病,选用血清作为样本比较合适;血浆是血液去除了血细胞之后得到的液体,一般情况下选择血浆更合适。尽量在采血 30min
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