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文献和实验1. 前言 在蛋白质组研究中,双向电泳图谱的比较占有重要地位。双向电泳必须能很好地分离各个蛋白质,应尽量避免拖尾、横纹或因蛋白质降解而产生的假相。蛋白质在图谱上的分布模式必须是可重复的。蛋白质样品的制备是这些条件得以保持的重要前提。植物蛋白提取的难点在于植物细胞中蛋白质的含量低,同时还含有很多干扰蛋白提取的有机物 ,如酚类、色素、脂类及核酸等 [1] 。提取出的蛋白必须溶解在与等电聚焦 (IEF ) 电泳缓冲系统兼容的样品溶液中。 经过在各种植物组织中的试验,我们建立了一种以三氯乙酸
酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。 7、BCIP溶液 【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃ 8、2×BES缓冲盐溶液 【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装
ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃ 8 . 2×BES 缓冲盐溶液 【配制方法】 用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2 HPO4 ,室温下用HCl调节该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。 9 . 1mol/L CaCl2 溶液 【配制方法】 在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl
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