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文献和实验演示:首先我们从 NCBI 上下载 TP53 基因序列,将其粘贴到相应选项框内,并转换为氨基酸序列,如下图:同时我们也会看到多出来的选项 5,如果我们要进行点突变,则需要勾选 5 后面的灰色圆圈在下面这个框选中我们要突变的目的氨基酸,如红色圆圈标出所示:同时在下面选框勾选出我们想要突变成的氨基酸,这个就表示我们将 N29 突变为 I(N29I),S33 突变为 K (S33K),L35 突变为 E (L35E),E55 突变为 C (E55C)该网站可以同时设计针对 7 个氨基酸的突变引物, 接下
固定在树脂上来伸长肽链一样,此方法也有很大的局限性,只在一些特殊情况下有应用。 2.聚酰胺 一般指聚丙酰胺凝胶。最先是由Sheppard等人提出用于多肽合成的 。将二甲基丙烯酰胺(2-1)、N、N`-双丙烯酰乙二胺(2-2)和不对称的二酰胺的衍生单体,如N-丙烯酰-N`叔丁氧羰基- β-丙烯酰-六次甲基二胺(2-3)共聚可得到珠状或无定形的丙烯酰胺载体(2-5a)。其中(2-2)为交联剂,(2-3)则是为了使载体带有可反应的氨基,及一个六碳隔离物链将官能团与聚合物主体分开。 采用聚丙
浅析染色质免疫沉淀(ChIP)技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性
或者尚不能得出确切结论,因此需要 ChIP 试验进行有力的支持。有研究 [6] 通过 WB, MSP,EMSA 等技术发现乳腺癌细胞的高度恶性与抑制肿瘤转移相关的 TFPI-2 基因启动子区过度甲基化有关,之后用 ChIP 试验则证实了该区域高度甲基化后确实转录水平因此受到影响,为上述的结论提供更充分的论据。类似的,Peng 等人 [13] 用 EMSA 技术得出水稻转录因子 OsLFL1 结合于 Ehd1 基因的启动子区的初步结论后,采用 ChIP 在体内重复出了这个结果,因此最终能确定该转录
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