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文献和实验性磷酸酶。 2. 一抗 一抗浓度过高，减少用量 3. 二抗 设置无一抗对照，帮助确认背景是否来源二抗。 二抗浓度过高，减少用量。 抗体凝聚，使用二抗前离心去掉抗体凝聚物。 使用高交叉吸附的Alexa Fluor Plus二抗，信噪比比Alexa Fluor提高4-5倍。 4. 自发荧光 设置自发荧光对照，确定是否自发荧光。 固定剂如醛类和氨基共价结合导致的自发荧光，可用NaBH4去除。 增加固定剂的漂洗次数。 避开背景
摘要：考察了填充柱超临界流体色谱法(SFC)中的样品溶剂及连续进样等因素对化音物慑留行为变化的影响规律。 以超临界C02或者低体积分散甲醇的CO2为流动相时，氨基柱上组分的保留时间随着样品溶剂的极性增大而增大，而溶剂对CO2柱上组分的保留时间影响不大；在CO2柱上，溶剂对连续进样的后续效应不强，而在氨基柱上，甲醇溶液的后续效应比丙酮、氧仿溶液的后续教应强 当甲醇的体积分数大于1.0%时，溶剂的效应明显减弱，这种变化规律对填充柱SFC的合理进样并获得重现性良好的色谱数据具有实际意义。
观察。此种方法简单有效，脑样本浸入含有氨基醇的混合物中，通过单光子激发显微镜便可快速进行全脑成像（图 3）。经灌注固定后的组织器官按顺序浸泡到 1/2 Reagent-1、Reagent-1、1/2 Reagent-2、Reagent-2 中（表 1），37℃ 水浴，以 60 rpm 的速度轻微震荡即可透明。透明后的样品转移到 Imaging Oil 中固定 1 小时后可在光镜下观察。CUBIC 适用于成人大脑中荧光蛋白或免疫染色样品的多色成像，并且与全脑细胞核复染方案和计算图像分析管道一起，可视
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