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上海一基实业有限公司
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文献和实验保存 E.5×样品缓冲液,10ml 0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(Ph6.8)、5ml 50%的甘油、2ml 10%的SDS、0.5ml 2-巯基乙醇、1ml 1%溴酚蓝,0.9ml的蒸馏水,可在4℃保存数周,或在-20℃保存数月。 ③ 二抗稀释液 AP-Anti mouse IgG(Whole molecule),SIGMA,CAT#A-3562; AP-Anti mouse IgGAM,ZYMED,CAT#62-6422 一般采取1:3000
有很大的促进作用。本文将对DHPLC 技术在 突变检测领域的应用实例进行介绍和讨论;介绍的重点分别是致病基因突变位 点的确认,以及药物代谢和耐药性相关基因突变的检测。 关键词:候选基因,变性高效液相色谱,DNA甲基化,药物代谢,抗药性, 遗传变异,基因突变,遗传药理学,SNP 筛查,SNP 确认,体细胞变异。 缩略词 5-FU---5-氟尿嘧啶,AD---阿尔茨海默病,早老性痴呆,APP---淀粉样前体蛋白 AS ---安格尔曼综合征,快乐木偶综合征,BWS---贝-威综合征,CF
甲硫氨酸 1μl,加双蒸水至98μl,加入2μl EcoRⅠ甲基化酶(8×104U/ml), 370C温浴1h,680C 15min。 2、 用等体积的酚/氯仿抽提一次,氯仿抽提一次,40C 12000g离心15min, 沉淀用70%乙醇洗涤后溶于30μl TE(pH8.0)。 五、 cDNA与连接子连接及连接后cDNA的过滤分离 试验试剂: 1、 EcoRⅠ酶 2、 1×104U/ml T4噬菌体DNA连接酶
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