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- 2025年07月12日
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文献和实验一、原理淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下，产生增殖反应，DNA和RNA合成明显增加，如在培养液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。二、仪器和材料RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯基乙醇（2-ME）、青霉素、链霉素、刀豆蛋白A（ConA）、Hank's液、PBS缓冲液（pH7.2-7.4）、3H-TdR、闪烁液[2，5-二苯基恶唑（PPO）0.5g、1，4-双-（5-苯基恶唑基）-苯
一、材料及试剂1、培养基：RPMI-1640或TC199培养液2、PHA；同形态学方法3、小牛血清4、3H-TdR；选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子的制品，将1Mci/ml溶液以生理盐水稀释成100uci/ml，于4℃保存备用。临用时再用培养液稀释成10uci/ml溶液。5、3%冰醋酸6、浓甲醛7、30%H2O2液8、闪烁液PPO（2，5二苯基噁唑）；5.00gPOPOP[1，4-双（5-苯基噁唑基-2苯；0.30g无水乙醇；200.00ml甲苯；800.00ml混合即可二、操作
T淋巴细胞转化试验（T Lymphocyte Transformation Test）
）-2，5-二苯基溴化四唑，水溶液为黄橙色。小鼠脾细胞受到ConA作用后发生增殖活化，其胞内线粒体琥珀酸脱氢酶活性相应升高，MTT作为其底物参与反应，形成蓝色的甲臜（Formazan）颗粒沉积于细胞内或细胞周围，经盐酸─异丙醇溶解后为蓝色溶液，可用酶标测定仪测定 细胞培养 物的OD值，测定波长570nm。根据OD值的大小计算反应体系中细胞增殖程度。 3 H-TdR 掺入法：细胞增殖的基本条件或前提为细胞质和细胞核的复制，这是正常细胞增殖过程缺一不可的前提。一般来说，一个
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