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文献和实验片段，需样品量少，能较直观的显示出甲基化情况[36]。缺点是：解链温度和DGGE的变性浓度梯度需要摸索。 2.2.8 甲基化敏感性解链曲线分析（methylation-specific melting curve analysis，MS-MCA） Worm等[37]2001年报道的MS-MCA是将DNA经重亚硫酸盐处理与Lightcycle联用检测DNA序列甲基化的方法。荧光素标记双链DNA。这种方法根据检测到的荧光度对应的解链温度，判断分析研究序列中甲基化的情况。在Lightcycle过程中
4B methylation in acute myeloid leukemia [J]. Cancer Res, 1999, 59: 436-441.[36]黄庆, 府伟灵. DNA甲基化分析技术 [J]. 中国实验诊断学, 2005, 9(2): 304-306.[37]Worm J, Aggerholm A, Guldberg P. In-tube DNA methylation profiling by fluorescence melting curve analysis [J]. Clin Chem
加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔.建议设5个，否则难以反应真实情况3.5%CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。4.每孔加入20ulMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液。5.终止培养，小心吸去孔内培养液。6.每孔加入150ul二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联
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