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文献和实验,斥力较大,故不稳定。甲基以e键连结的分子约占95%,而以a键连结的分子仅占5%,且存在如下的动态平衡: 95%5% 当取代基越大时,这种以e键取代的构为主的趋势越大。 二元取代的环己烷可以有1-2-,1-3-和1.4-三种位置异构体,在每一种构体中,又有顺式与反式异构体。以1,2-二甲基环己烷为例,顺式异构体中两个甲基位于环平面的同侧,其相应的构象式为: 这两个构象式实际上是相同的,都是一个甲基连于e键,另一
染色体步移是一种常用的克隆已知基因旁侧序列的技术。基因的表达调控已成为分子生物学研究热点之一,启动子是基因表达调控的重要顺式元件,启动子的克隆对于研究基因表达调控,构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,常见的扩增启动子或已知序列末端旁侧的核苷酸序列的方法有两种:方法一 酶切加接头1 大量提取基因组 DNA(1)取样品 100 mg,置于 1.5 mL EP 管中,加入 500 uL 裂解液(56 °C),用研磨棒充分匀浆。(2)加入 350 uL 苯酚(pH
近几年来,随着分子生物学、遗传学及其新技术的迅速发展,真核生物基因表达(geexprc~ioB)的问题已有了突破性的进展。认为真核细胞基因的表达,受到多层次的调控,诸如转录,转录后,翻译、翻译后等水平。而不同基因的表达受到不同水平的调控,其中最为主要的就是转录水平的调控。转录水平的调控涉及到顺式作用元件(cls acting elemeat)、反式作用因子(t rans acting factor)和“基本转录单位”等。顺式元件是指对基因转录有调控作用的DNA序列,反式作用因子是指能直接或间接
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