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- 2025年09月15日
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上海一基实业有限公司
【编号】：YJ1012207产品货源充足，质量保证，下单即可发货,本公司产品仅供科研实验使用，不得用于临床或食用！专供：ELISA试剂盒，PCR恒温荧光测试盒、朗道校准品、校准质控品、标准品|对照品、抗体|抗原、生物试剂等高端产品。购买时请联系客服索要说明书。联系方式：可直接致电客服电话，可点击当前页面QQ图标进行临时对话，也可在留言框发布留言，我们收到后会及时沟通。
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文献和实验速度最好是选用 Bradford 法了。但是，Bradford 也存在一些问题，比如标准曲线线性相关性不佳，容易受 Triton，SDS 等去垢剂的影响等等。好在我们都是站在前人的肩膀上，前人早已开发出去垢剂兼容型的 Bradford 试剂，性能优于常规 Bradford 法，比 BCA 法更快更方便。今天我们讨论的方法就是基于去垢剂兼容型的 Bradford 试剂来快速蛋白定量。不知道上哪里买的同学可以在丁香通上找找。下图就是用 Bradford 法测出的标准曲线。虽然线性拟合不佳（R
发光基团pNA游离出来，可通过酶标仪或分光光度计（λ=405nm 或400nm）测定其吸光值，通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1．准备工作： A、 裂解液溶解后混匀，冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备：每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT，冰浴备用。 2．样本处理： A、悬浮细胞 1） 诱导完成后的细胞，2000 rpm离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS轻轻重悬细胞并计数
的标准蛋白作标准品。如果只需要相对蛋白浓度，那么任何一种纯化蛋白均可作为对照标准品。 Bio–Rad 提供两种蛋白标准品，小牛gamma−球蛋白和牛血清白蛋白(BSA)标准品。当你用Quick Start Bradford和Bio–Rad 蛋白测定试剂盒测定蛋白浓度时，那么标准品的选择就要慎重一些。如果你的样品中主要含有白蛋白，那么BSA将是一个好选择。如果你的样品包含了多种蛋白，gamma-球蛋白可能更合适。而DC和RC DC蛋白测定就几乎不受到标准品的影响，你爱选哪个选
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