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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
液态/冻干粉
- 保存条件:
-20℃保存
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
FITC
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-2092 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications.
- 浓度:
1629mg/ml
- 抗体英文名:
NPTII/Neomycin Phosphotransferase 2
- 规格:
0.1ml 0.1594ml
【抗体的鉴定】
筛选杂交瘤细胞通过选择性培养而获得杂交细胞系中,仅少数能分泌针对免疫原的特异性抗体。一般在杂交瘤细胞布满孔底1/10面积时,即可开始检测特异性抗体,筛选出所需要的杂交瘤细胞系。
检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同,选择不同的筛选方法,一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。
【抗体溶解方法】
方法1:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,最好分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;
方法2:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。
后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。
我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。
Antibodies are prepared with 0.01M PBS, pH 7.4 with 1% BSA and 0.1% Sodium Azide, prior to lyophilization. Currently, we offer both lyophilized and reconstituted antibodies, both resulting in final concentration of 1mg/mL. We recommend two ways to reconstitute antibodies in lyophilized form:
1) Reconstituting by directly adding 100uL of sterile, distilled water.
2) Alternatively, if glycerol does not affect the experiment, add 50uL sterile distilled water, followed by adding 50uL of glycerol.
修复液:0.01M 枸橼酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
【抗体修复方法】
方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;
方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。
DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)
称DAB 30mg,用0.05mol/L pH7.6 Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用;
使用前加入1% H2O2 1ml至1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。7、3′,3′,5′,5′,-四甲基联苯胺(TMB)
【溶液配制】
用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用;
使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1% TMB溶液中,再按每毫升TMB加入30% H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。
8、1%离子琼脂胶配制液
作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。
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文献和实验黄素腺嘌呤二核苷酸 flavin(e) adenine dinuclectide
亦称核黄素腺嘌呤二核苷酸或异咯嗪腺嘌呤二核苷酸,缩写为 FAD。由核黄素(维生素 B2 )和二个磷酸基及腺苷组成的二核苷酸。广泛分布在好氧生物和厌氧生物的体内。同黄素单核苷酸一样,在生物氧化过程中,对电子的传递起着重要的作用,即作为黄素酶类的辅酶而起作用,参与电子从底物到电子接受体的传递。在 450、 375和 260纳米处具有吸收带,但一旦与蛋白质部分结合,一般吸收带便离去原来的状态。 FAD在生物体内,可由 FMN和 ATP通过焦磷酸化酶( FMN腺苷酰(基)转移酶
【求助】P53的翻译后修饰都有哪些? 怎样验证其修饰后与靶标启动子的结合活性的变化?
蛋白质功能的一个主要机制,p53在多个位点上可被磷酸化、顺-反异构化、乙酰化、泛素化、甲基化、糖基化等修饰,从而显示其生物学重要性。这种显示细胞或组织特异性并依赖细胞周期位置的多重修饰,是一种复杂的调节方式,随着细胞对DNA损伤、增殖、老化等产生的细胞信号的反应而发生波动。 磷酸化修饰 P53的磷酸化在多数情况下与蛋白质的稳定性有关。p53 N-末端的三个位点Ser15、Thr18、Ser20磷酸化后,使p53和其主要的负性调节因子MDM2之间的相互作用消失,而和乙酰转移酶
, 新霉素磷酸转移酶基因,对卡那霉素, G418, 巴龙霉素及新霉素等具有抗性;aphIV, 潮霉素磷酸转移酶基因,对潮霉素具有抗性;spt, 链霉素磷酸转移酶基因,对链霉素具有抗性;cat, 氯霉素乙酰转移酶基因,使氯霉素丧失抗菌素活性;Aacc3和aacc4, 庆大霉素3-N-乙酰转移酶基因,对庆大霉素有抗性;ble, 博来霉素抗性基因,对博来霉素有抗性。2. 抗除草剂抗性基因bar, 编码膦化麦黄酮乙酰转移酶(PAT),使PPT(膦化麦黄酮)的自由氨基乙酰化而对PPT中毒。抗除草
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