黑色素瘤分化相关蛋白5抗体

上海雅吉生物科技有限公司专注于抗体研发生产十五年，拥有专业的抗体研发生产团队，可为客户提供包含抗原设计—多肽合成、蛋白表达—动物免疫—抗体纯化—抗体标记—免疫学检测等项目的一站式抗体制备服务。根据客户的实验需求，现提供兔、小鼠、大鼠、羊、狗等多种动物种属的多克隆抗体制备服务。

【抗体的鉴定】

筛选杂交瘤细胞通过选择性培养而获得杂交细胞系中，仅少数能分泌针对免疫原的特异性抗体。一般在杂交瘤细胞布满孔底1／10面积时，即可开始检测特异性抗体，筛选出所需要的杂交瘤细胞系。
检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同，选择不同的筛选方法，一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。

【抗体溶解方法】

方法1：我们的抗体（冻干粉）已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂（叠氮钠或庆大霉素），您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后，置于-20℃保存，最好分装后使用，避免反复冻融，可保证至少1年有效；
方法2：也可以只加入一半体积的双蒸水，再用一半体积的甘油补足，置于-20℃保存，这样抗体不会冻，有利于抗体的稳定。

后续试验时，再使用对应的缓冲液稀释成工作液，即用即配。
我们的抗体（冻干粉），在常温放置下，至少一个月有效；若在-20℃下保存（推荐），至少三年有效。
Antibodies are prepared with 0.01M PBS, pH 7.4 with 1% BSA and 0.1% Sodium Azide, prior to lyophilization. Currently, we offer both lyophilized and reconstituted antibodies, both resulting in final concentration of 1mg/mL. We recommend two ways to reconstitute antibodies in lyophilized form:
1) Reconstituting by directly adding 100uL of sterile, distilled water.
2) Alternatively, if glycerol does not affect the experiment, add 50uL sterile distilled water, followed by adding 50uL of glycerol.
修复液：0.01M 枸橼酸（pH6.0）或者0.05M EDTA（pH8.0）

【抗体修复方法】

方法1：沸水浴修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境，保持外部沸腾状态15min，自然冷却至室温；
方法2：微波修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中，高火5min，停火3min，中火5min，自然冷却至室温。
DAB溶液配制：（组化及Western blot 显色）
称DAB 30mg，用0.05mol/L pH7.6 Trs-HCL缓冲液100ml溶解，如有沉淀，过滤后使用，一般新鲜配制使用；
使用前加入1% H2O2 1ml至1.5ml，H2O2浓度为0.01%，混均后使用。7、3′，3′，5′，5′，-四甲基联苯胺（TMB）

【溶液配制】

用二甲基甲酰胺（dimethylformamide，DMF）或无水乙醇，将TMB配成1%浓度，4°C保存半年以内使用；
使用前，用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml（1mg/TMB）1% TMB溶液中，再按每毫升TMB加入30% H2O2 1ul，混匀后立即使用。2N H2SO4终止后，450nm测定OD值。
8、1%离子琼脂胶配制液
作免疫双相扩散，单相扩散及免疫电泳中使用。