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甲基化CpG结合蛋白MBD4抗体

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  • ¥1250
  • 上海雅吉生物科技有限公司
  • YS-18704R
  • 2025年07月11日
  • ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-1518 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications.
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    • 亚型

      IgG

    • 形态

      液态/冻干粉

    • 保存条件

      -20℃保存

    • 克隆性

      多克隆

    • 标记物

      FITC

    • 宿主

      Rabbit

    • 应用范围

      ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-1518 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications.

    • 浓度

      1055mg/ml

    • 抗体英文名

      MBD4

    • 规格

      0.1ml 0.1020ml

    上海雅吉生物科技有限公司专注于抗体研发生产十五年,拥有专业的抗体研发生产团队,可为客户提供包含抗原设计—多肽合成、蛋白表达—动物免疫—抗体纯化—抗体标记—免疫学检测等项目的一站式抗体制备服务。根据客户的实验需求,现提供兔、小鼠、大鼠、羊、狗等多种动物种属的多克隆抗体制备服务。

    【抗体的鉴定】

    筛选杂交瘤细胞通过选择性培养而获得杂交细胞系中,仅少数能分泌针对免疫原的特异性抗体。一般在杂交瘤细胞布满孔底1/10面积时,即可开始检测特异性抗体,筛选出所需要的杂交瘤细胞系。
    检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同,选择不同的筛选方法,一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。

    【抗体溶解方法】

    方法1:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,最好分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;
    方法2:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。

    后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。
    我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。
    Antibodies are prepared with 0.01M PBS, pH 7.4 with 1% BSA and 0.1% Sodium Azide, prior to lyophilization. Currently, we offer both lyophilized and reconstituted antibodies, both resulting in final concentration of 1mg/mL. We recommend two ways to reconstitute antibodies in lyophilized form:
    1) Reconstituting by directly adding 100uL of sterile, distilled water.
    2) Alternatively, if glycerol does not affect the experiment, add 50uL sterile distilled water, followed by adding 50uL of glycerol.
    修复液:0.01M 枸橼酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)

    【抗体修复方法】

    方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;
    方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。
    DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)
    称DAB 30mg,用0.05mol/L pH7.6 Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用;
    使用前加入1% H2O2 1ml至1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。7、3′,3′,5′,5′,-四甲基联苯胺(TMB)

    【溶液配制】

    用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用;
    使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1% TMB溶液中,再按每毫升TMB加入30% H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。
    8、1%离子琼脂胶配制液
    作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。

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    相关实验
    • DNA 甲基化检测与肿瘤的那些事儿

      免疫沉淀技术(MeDIP)与甲基化 CpG 结合蛋白亲和捕获技术(MBDCap):MeDIP 方法在将基因组 DNA 超声波打断并变性后,使用 5-甲基胞嘧啶特异性抗体富集甲基化片段,再分离纯化得到甲基化 DNA 片段,然后再用测序等方法分析;MBDCap 技术与 MeDIP 方法类似,利用甲基化 DNA 结合蛋白来对甲基化的 DNA 进行免疫沉淀,因为采用的富集蛋白不同,MeDIP 普遍富集 CpG 低密度的甲基化区域,而 MBDCap 则普遍富集 CpG 高密度的甲基化区域。 图

    • DNA甲基化研究方法的回顾与评价(下)

      性多位点甲基化CpG位点相结合,另一种是MeCP2,不同于MeCP1的是它能够与单甲基化CpG位点特异结合,且不与半甲基化位点结合。而且报道的MBD1、MBD2、MBD3、MBD4蛋白都与MeCP2有着相同的特性[54,55]。 这种方法是:MBD柱中含有甲基化位点特异性结合蛋白的功能区(Methylation Binding Domain, MBD),能够与甲基化位点特异性结合。该蛋白一端通过连接多个组蛋白与凝胶结合,其另一端的多肽功能区暴露,这样当待测DNA片段通过时,含有甲基化位点的DNA

    • DNA甲基化研究方法的回顾与评价(上)

      的情况,但不能对甲基化CpG位点进行定位。 2.1.2 SssI 甲基转移酶法[22] SssI甲基转移酶能够催化DNA的CpG位点发生甲基化。3H-S-腺苷甲硫氨酸(3H-SAM)在SssI甲基转移酶催化作用使基因组DNA的CpG位点发生甲基化。通过测定剩余的放射性标记的SAM即可得到原基因组整体甲基化水平,即测到的放射性强度与所测DNA甲基化水平成反比。这种方法的缺点是所使用的SssI甲基转移酶不稳定,致结果不够精确。 2.1.3 免疫化学法[23] 这种方法是基于单克隆抗体能够与5mC发生

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