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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
液态/冻干粉
- 保存条件:
-20℃保存
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
FITC
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-1368 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications.
- 浓度:
905mg/ml
- 抗体英文名:
RASGRP2
- 规格:
0.1ml 0.870ml
【抗体的鉴定】
筛选杂交瘤细胞通过选择性培养而获得杂交细胞系中,仅少数能分泌针对免疫原的特异性抗体。一般在杂交瘤细胞布满孔底1/10面积时,即可开始检测特异性抗体,筛选出所需要的杂交瘤细胞系。
检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同,选择不同的筛选方法,一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。
【抗体溶解方法】
方法1:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,最好分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;
方法2:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。
后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。
我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。
Antibodies are prepared with 0.01M PBS, pH 7.4 with 1% BSA and 0.1% Sodium Azide, prior to lyophilization. Currently, we offer both lyophilized and reconstituted antibodies, both resulting in final concentration of 1mg/mL. We recommend two ways to reconstitute antibodies in lyophilized form:
1) Reconstituting by directly adding 100uL of sterile, distilled water.
2) Alternatively, if glycerol does not affect the experiment, add 50uL sterile distilled water, followed by adding 50uL of glycerol.
修复液:0.01M 枸橼酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
【抗体修复方法】
方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;
方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。
DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)
称DAB 30mg,用0.05mol/L pH7.6 Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用;
使用前加入1% H2O2 1ml至1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。7、3′,3′,5′,5′,-四甲基联苯胺(TMB)
【溶液配制】
用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用;
使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1% TMB溶液中,再按每毫升TMB加入30% H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。
8、1%离子琼脂胶配制液
作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。
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文献和实验核苷酸(GTP和GDP)和GTP酶的活性(水解GTP为GDP)。当结合GTP时,Ras―P21处于活性状态;当结合GDP时,则处于非活性状态。在Ras―GTP和Ras―GDP这两种构象中,只有Ras―GTP能激活Ras以下的信号转导过程,所以Ras蛋白可以通过两种构象的互换控制细胞信号转导,从而调节细胞分化、增殖和凋亡过程。 Ras通路有下列成员所构成:生长因子受体(受体酪氨酸蛋白激酶)一含有SH2结构域的接头蛋白(如Grb2)一鸟嘌呤核苷酸释放因子(如SOS)一Ras蛋白一MAPKKK
具有募集Grb2和SOS复合物的能力。SOS在与生长因子受体结合的过程中移位至胞质,并与Ras相互作用,促进Ras与GTP结合,使Ras活化。此外,Ca2+可通过不同的作用机制激活Ras蛋白:①通过l型电压依赖性的钙离子通道流人细胞内,经由Src家族蛋白激酶的介导,导致表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸磷酸化,进而通过Shc―Grb2―SOS复合物激活Ras;②通过Ca2+敏感性的Ras鸟嘌呤核苷酸释放因子(Ras―GRF)和Ca2+―钙调蛋白复合物与Ras―GRF结合,通过诱导Ras进行GTP
2结构域的接头蛋白(如Grb2)→鸟嘌呤核苷酸释放因子(如SOS)→Ras蛋白→MAPKKK(如Raf1)→MAPKK→MAPK→转录因子等(图21-24)。 图21-24 EGF受体介导的信号转导过程 表皮生长因子与受体结合后,可以使受体发生二聚体化,从而改变了受体的构象,使其中的蛋白酪氨酸激酶活性增强,受体自身的酪氨酸残基发生磷酸化,磷酸化的受体便形成了与含SH2结构域的蛋白分子Grb2结合的位点,导致Grb2与受体的结合。Grb2中有两个SH3结构域,该部位与一种称为
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