BstEII限制性内切酶 工具酶

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名称：BstEII限制性内切酶 工具酶
编号：SV0251
英文名：BstEII Restriction Endonuclease
规格：10KU|10KU|2KU|1KU
产地：国产|进口
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 75%
特性
重组酶、省时酶。
反应条件
BalbBuffer 3.1，60℃。
浓度
10,000和50,000units/ml。
37℃ 时活性
50%。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项
在已知的 3,000 多种限制性内切酶中，BstEll 是少数几个能够产生多于 4 个碱基突出端的内切酶之一。
甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性。

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·T4 DNA 聚合酶
编号：SV0955
规格：750U|150U
特性:
缺口填充（无链置换活性）
切除 3´ 突出末端或补平 5´ 突出端，形成平末端
通过置换合成法标记探针
单链删除后亚克隆
概述:
在模板及引物存在的条件下，T4 DNA 聚合酶催化沿 5´→3´ 方向合成 DNA。此酶还具有 3´→5´ 外切核酸酶的活性，该活性比 DNA 聚合酶 I 强。与 DNA 聚合酶 I 不同，T4 DNA 聚合酶不具有 5´→3´ 核酸外切酶活性。
来源:
从一种携带有高表达 T4 DNA 聚合酶基因的 E.coli 中提纯制备的。
浓度:
从一种携带有高表达 T4 DNA 聚合酶基因的 E.coli 中提纯制备的。
热失活:
75℃ 20 分钟。
注意事项:
由于该酶具有 3´→5´ 核酸外切酶的活性，提高反应温度、增加酶量、没有加入 dNTP 或反应时间过长都可能造成 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。


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·T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ
编号：SV1380
规格：10KU|2KU
特性:
将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异性 cDNA 文库构建
概述:
T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到 RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。
T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（M0242）的双点突变体。K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性，K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
连接反应的背景被降为最低是因为:不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶已用于二代测序 small RNA 的文库构建中，优化了接头的连接过程。
来源:
重组 E. coli 菌株，携带有 MBP 融合表达的质粒，该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前 249 个氨基酸编码。T4 Rnl2tr K227Q 将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 227 位置进行了突变，精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。
反应条件:
1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂:
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000
质保声明:
无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
单位定义:
200 单位指 10 μl 反应体系中，25℃ 条件下，1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
200,000 units/ml。


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