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名称:抗 MBP 单克隆抗体,HRP 标记价格
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:SV1423
概述:
抗 MBP 单克隆抗体(HRP 标记),是鼠抗麦芽糖结合蛋白抗体,属 IgG2a 型抗体。共价耦联辣根过氧化物酶并经纯化而得。
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文献和实验问:有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊,能不能把你们的步骤发给我。本人开始做,发现很多人用的浓度都不一样。答:1.1 试剂准备1) 10mg/mL HRP2) 0.06mol/L NaIO43) 0.16mol/L乙二醇4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中,调pH值到9.5)5) 2.5mg/mL NaBH46) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.41.2 操作步骤1. 10mg/mL取HRP VmL,溶液为棕黄色,加入
盐水。 (6)PH7.8饱和硫酸铵溶液及半饱和硫酸铵溶液。 (7)萘氏试剂及聚乙二醇(PEG,MW2000)。 (8)纯化的特异性抗体或抗Ig抗体。 (9)HRP(RZ>3.0)。 (10)Sephadex G-25层析柱(2cm×50cm)。 (11)搅拌器,分光光度计,离心机。 (12)透析袋,大、小烧杯,试管,吸管等。 二、简易过碘酸钠法 本法是以NaIO4先将HRP表面的糖分子氧化成醛基,然后再与Ig上的氨基相结合,所获酶标记抗体的产率高,将近70%的HRP和Ig结合,99%的Ig
酶与抗体交联的方法有许多种 , 根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备 HRP 结合物,可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。 戊二醛二步法 1. 原理:戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶 - 戊二醛 - 免疫球蛋白结合物。 2. 标记步骤: (1) 称取 HRP25
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