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赫澎(上海)生物
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文献和实验例一 gongyulai :我用的是药物诱导癌细胞凋亡,做DNA Ladder(用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取试剂盒)。跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象,Marker到是出来了。我是按说明书上0。8%的琼脂糖。我用的是60v电压。不知道什么原因?郁闷。说明书上说混合温和是什么意思,我又没用力摇。我还想问收集凋亡细胞时离心时转速多少比较好?chujun_hust :(1)“跑出来的电泳不是一条条带,而是每条很长的拖尾现象”: 可能是由于你点样时,时间太长了,导致样品扩散
4度离心,然后弃上清,将两管收集在一起,用PBS洗一次,然后就开始进行细胞裂解了!我不知道wscoco78是怎么做的,我也想知道更好的收集凋亡细胞的方法阿! 我今天进行了DNA LADDER的电泳(方法是按照细胞实验指南上面做的,参考了wscoco78的宝贵建议),效果不错!发现这个方法真的不错,省力! 图像说明:两边的孔是加了lamda DNA marker的,第二、三孔(从左边数起)分别是两种细胞的对照组(即未任何处理过的细胞),其它的是用顺铂处理细胞的不同浓度和不同
1、Marker选择标准(1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。(2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。2、常见问题分析Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带?A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2. 电泳
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