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赫澎(上海)生物
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文献和实验【求助】shRNA连接时,如果没有annealing buffer,可不可以用PCR buffer?
bobbymm shRNA要做连接的时候发现 annealing buffer 没有了。可以用 PCR buffer代替不? zhujoker 就用普通的去离子水就可以了,没有那么复杂。不要想当然得使用PCR buffer。 bobbymm 用的是TAKARA的PCR BUFFER ,连接的还不错。 已经送去测序了。 谢谢回复。 本文
The Polymerase Chain Reaction (PCR)
• Template DNA • Reaction buffer (Tris, ammonium ions(and/or potassium ions), magnesium ions,bovine serum albumin) • Nucleotides (dNTPs) • Primers • DNA polymerase (usually Taq) PCR In Detail • Denature, anneal, extend and repeat the cycle 30 to 35
多聚酶链式反应即PCR(polymerase chain reaction)技术
一、PCR技术的工作原理 PCR的基本工作原理是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5'末端和3'末端互补的寡核苷酸片段为引物(primer),在耐热DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA分子合成。重复这一过程,即可使目的DNA片段得以大量扩增(图14-1)。 组成PCR反应体系的基本成分包括:模板DNA、特异性引物、耐热DNA聚合酶(如Taq DNA聚合酶)、dNTP以及含Mg2+的缓冲
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