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- 2025年07月07日
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- 文献和实验
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- 供应商：
上海研谨生物科技有限公司
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大量现货
- 规格：
500 Tubes and 500 Caps / 箱
货号：【SCT-50ML-500】
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文献和实验在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
PBS (D8537)，在室温下静置15-20分钟。 15-20分钟后，旋转培养皿以进一步分离ECM基质胶胶滴穹顶结构，并将1X PBS (D8537)倒入第5步中含有类器官沉淀的50mL锥形管中。 将步骤5-7再重复三次。 在不伤害类器官沉淀的情况下吸出溶液，沿着含有类器官沉淀的50 mL锥形管的一侧慢慢加入5 mL 1X PBS (D8537)，并旋转试管使类器官团块重悬。 注：不要用吸管上下吹打。否则会破坏大部分类器官。 将5 mL含有类器官团块的1X PBS (D8537)直接
人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
。 5. 每孔加入2ml 1X PBS (BSS-1006-B)稀释AccuMax™溶液(A7089)。将细胞悬浮液置于50ml锥形管中。用1ml 1X PBS冲洗每孔，收集任何剩余的细胞，并加入到50ml锥形管中。移液器上下吹打几次以实现单细胞悬浮状态。 6. 室温下，细胞悬液130 x g离心5分钟。 7. 吸出上清液。 在 2 mL 的 AFE 诱导培养基 I (SCM305) 中重新悬浮细胞沉淀。 使用自动细胞计数器或血细胞计数器对细胞进行计数。 在 PBS 中配制4μg/mL的纤连蛋白 (F
。 8、用20ml培养基以终止胰蛋白酶/EDTA的消化，将皿中的物质转移至50ml锥形管中。 9、混匀管内的物质，加入到含有20ml培养基的T75培养瓶中。每个培养瓶中装大约3个胚胎。 10、将这些培养瓶放在培养箱中37℃培养过夜。 11、将胚胎置于PBS中，并重复第5步。 12、第二天更换培养基，以去除碎片和中毒的细胞及其分泌的物质。 13、当培养瓶中的细胞长到80-90%汇合时并仍处于指数生长期时，是冻存细胞的最佳时期。一般说来
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