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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海研谨生物科技有限公司
- 现货状态:
大量存货
- 规格:
5个/包
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文献和实验板置于显微镜下。在不破坏单层细胞的情况下,用移液器吸头轻轻移出自由漂浮的球体,并将其转移到 1.5ml 的离心管中。让球状体在离心管底部沉降 5-10 min,必要情况下可以用微量离心机低速离心 10s。 9、将吸出的球体接种于 200μl 含蛋白浓度 8.0mg/ml 的 Matrigel 胶中,轻轻吹打混匀,迅速操作并防止气泡产生。 10、在 24 孔板的每个培养孔中心接种 25μl 混合液,放入 37℃ 培养箱中静置 10min。待 Matrigel 凝固后,加入 0.5ml hLOs
液在 QIA shredder 离心柱上离心2min (以除去细胞壁和沉淀); (f)将溶液转移至另一干净的2ml Eppendorf 管中,弃去沉淀; (g)加入0.5倍体积的 AP 3溶液,混匀。为了避免氯化物的生成,不要将 AP 3溶液与次氯酸钠混合。加入1倍体积的无水酒精,混匀; (h)将溶液放在 DNeasy minispin 柱上,10000×g离心1min (使DNA 附着在层析柱上)。柱子的最大容积为650μl ,此步骤可重复若干次; (i)将柱子放置于新的2ml
);胰凝乳蛋白酶原(Mr 25 000);细胞色素c(Mr 12 800)。 三、仪器层析柱;恒压洗脱瓶; 紫外检测仪或紫外分光光度计;自动分部收集器。 操作方法 一、溶胀凝胶 取Sephadex G-100 15g,加200mL蒸馏水,沸水浴中溶胀5小时。待溶胀平衡后,倾去上层清液,包括细颗粒,然后再放些蒸馏水搅乱,静置使凝胶下沉,再倾去上层清液,至无细颗粒为止。溶胀平衡和漂洗净的凝胶经减压抽气除去气泡,即可准备装柱。 二、装柱 层析柱
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