M-FC培养基，含玫红酸，粪便大肠杆菌，2 mL 广口玻璃安

手把手教你做好体外 DNA 重组

苄青霉素及 140 g/mL X-gal。作为载体的质粒都含有一种或两种抗生素的耐药基因，当把这种质粒转入大肠杆菌后，此菌便获得了抵抗这种抗生素的能力。目前分子克隆所用的克隆载体多含氨苄青霉素耐药基因，所以涉及最多的是氨苄青霉素筛选。当将氨苄青霉素加入培养基中后，只有含质粒的细菌能够繁殖，而不含质粒的细菌则不能繁殖形成菌落。此种筛选不能鉴别重组质粒或自身环化的质粒。在用含氨苄青霉素耐药基因的质粒进行克隆时，转化平板培养基中要加入氨苄青霉素。（四）质粒和菌株的保存:1. 质粒可以在-20 ℃ 冰冻保存。2. 菌株

ELISA 实验样本处理方法

上清液，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。 组织匀浆 1） 用预冷的PBS（0.01M，PH7.4）冲洗组织以除去表面残留的血液或杂质（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果）。 2） 将组织块称重，然后切成尽可能小的碎块，以便充分匀浆。 3） 加入适量的预冷PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂），用玻璃匀浆器在冰上或冰浴中充分匀浆。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复

大肠杆菌微生物学检查法

（一）细菌的分离鉴定 1.标本：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。 2.分离培养与鉴定：粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血液需先经肉汤增菌，再转种血琼脂平板。其他标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。37℃孵育18～24小时后，观察菌落并涂片染色镜检。采用一系列生化反应进行鉴定。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。必要时检定肠霉毒素。 泌尿系统除确定大肠杆菌外，还应计数，每毫升尿含菌量≥100，000时，才有诊断